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　　猴痘病毒檢測試劑盒的組合物由一個引物對和一個探針組成：引物對由序列表中序列1和序列2所示的兩條單鏈DNA分子組成：探針的序列為序列表中序列3,。利用本發(fā)明所提供的NASBA試劑盒對猴痘病毒進行檢測,，具有操作簡便，快速,、特異的優(yōu)點,。本發(fā)明可快速篩查猴痘病毒，對口岸輸入性疾病篩查具有重要意義,，為防御疾病的傳入做好技術(shù)支撐和戰(zhàn)略儲備,，滿足當前衛(wèi)生檢疫的需求。
 

　　猴痘病毒檢測試劑盒檢測結(jié)果和判定標準：
 

　　試驗結(jié)果成立的條件：陽性對照PCR反應產(chǎn)物電泳后在301bp的位置上出現(xiàn)特異性條帶,；陰性對照PCR產(chǎn)物電泳后沒有條帶,，試驗結(jié)果成立，否則結(jié)果不成立,。
 

　　結(jié)果判斷：在試驗結(jié)果成立的前提下,，如果樣品PCR反應有特異性的條帶，則樣品為陽性,；反之,，為陰性。
 

　　猴痘病毒檢測試劑盒性能檢測：
 

　　1.PCR檢測試劑盒的重復性檢測對同一批提取的猴痘病毒陽性模板進行10次PCR擴增,，觀察試劑盒對同一批次陽性模板擴增的結(jié)果,。對10批提取的猴痘病毒陽性模板進行PCR擴增,，觀察試劑盒對不同批次提取的陽性模板擴增的結(jié)果,。
 

　　2.PCR檢測試劑盒的穩(wěn)定性檢測用配制好的檢測試劑盒分裝后保存在-20℃冰箱中，每隔7d對陽性模板進行PCR檢測,，連續(xù)檢測6個月,，觀察試劑盒在-20℃保存的穩(wěn)定性。用配制好的PCR反應混合物分裝后分別保存在4℃冰箱或室溫中,，每隔12h對陽性模板進行PCR檢測,，連續(xù)檢測4d，觀察試劑盒在室溫或4℃保存的穩(wěn)定性,。用配制好的PCR反應混合物分裝后保存在-20℃冰箱后,，分別凍融1~10次后,，對陽性模板進行PCR檢測，觀察凍融次數(shù)對試劑盒的影響,。