經(jīng)常吃的銀耳木耳就有,！測測其中的糖含量
關(guān)鍵詞：離子色譜；食用菌,；巖藻糖,；阿糖醇；海藻糖,；甘露糖,；甘露醇,；葡萄糖；半乳糖,；核糖,；方法學。
前言
食用菌屬于真菌類生物,并含有生物活性物質(zhì),可以在一定程度上提高人體的免疫力,食用菌也有抗癌的作用,其中所含的多糖體可以刺激抗體的形成,從而增強內(nèi)部防御能力,并降低某些物質(zhì)誘發(fā)腫瘤的幾率,。
目前市面上出現(xiàn)的食用菌保健品,，無法確定其提取液是食用菌提取出來的，還是由其他添加劑中提取出來的,。所以將樣品中單糖提取出來并水解,，根據(jù)糖的分布不同以此來鑒定不同食用菌。
皖儀開發(fā)了一種離子色譜測試方法檢測食用菌中的八種糖含量,，樣品前處理操作簡單,，測試準確性高，重現(xiàn)性好,，不同組分間分離度良好,，可以滿足客戶大規(guī)模測試的要求，并且提高時效性,，測試結(jié)果一致性,，減少人為及系統(tǒng)誤差。
1. 實驗方法
1.1 測試條件
離子色譜儀IC6300系列
儀器：IC6300系列離子色譜儀配置安培檢測器,；
色譜柱：糖類專用色譜柱（4.0mm×250mm）,；
保護柱：糖類專用保護柱（30 mm×4 mm）；
柱溫：45℃,；
流速：0.4ml/min,；
進樣量：25μL；
檢測器：安培檢測器,。
1.2 使用試劑
淋洗液：A：超純水 B：600mM NaOH
標樣：
巖藻糖：純度≥99％或經(jīng)國家認證授予標準物質(zhì)證書的標準物質(zhì),；
阿糖醇：純度≥99％或經(jīng)國家認證授予標準物質(zhì)證書的標準物質(zhì)；
海藻糖：純度≥99％或經(jīng)國家認證授予標準物質(zhì)證書的標準物質(zhì),；
甘露糖：純度≥99％或經(jīng)國家認證授予標準物質(zhì)證書的標準物質(zhì),；
葡萄糖：純度≥99％或經(jīng)國家認證授予標準物質(zhì)證書的標準物質(zhì)
半乳糖：純度≥99％或經(jīng)國家認證授予標準物質(zhì)證書的標準物質(zhì)
核糖：純度≥99％或經(jīng)國家認證授予標準物質(zhì)證書的標準物質(zhì)
甘露醇：純度≥99％或經(jīng)國家認證授予標準物質(zhì)證書的標準物質(zhì)
樣品：食用菌
1.3 標準溶液制備
單一標準儲備液：分別稱取0.1g（精確至0.1mg）巖藻糖、阿糖醇,、海藻糖,、甘露糖、甘露醇,、葡萄糖,、半乳糖、核糖標準品,，用0.1％苯甲酸溶液溶解,，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶定容至刻度,，配置成濃度為1000mg/L的單一標準儲備液，貯存在4℃條件下,，有效期一個月。
混合標準中間液(100mg/L):分別移取20.00mL巖藻糖,、阿糖醇,、海藻糖、甘露糖,、甘露醇,、葡萄糖、半乳糖,、核糖單一標準儲備液于200mL容量瓶中,用0.1％苯甲酸溶液定容至刻度,。置于0℃~4℃密封，保存期1個月,。
混合標準工作液:分別吸取0.250mL,、0.500mL、1.00mL,、2.00mL,、5.00mL、10.00mL,、20.00mL和50.00mL混合標準中間液(100mg/L)于100mL容量瓶中,用0.1％苯甲酸溶液定容至刻度,配得巖藻糖,、阿糖醇、海藻糖,、甘露糖,、甘露醇、葡萄糖,、半乳糖,、核糖質(zhì)量濃度為0.25mg/L、0.50mg/L,、1.00mg/L,、2.00mg/L、5.00mL,、10.00mL,、20.00mg/L和50.00mg/L的混合標準工作液。臨用現(xiàn)配,。
1.3 標準曲線的制備
混合標準工作液：分別吸取0.250mL,、0.500mL、1.00mL,、2.00mL,、5.00mL,、10.00mL、20.00mL和50.00mL混合標準中間液(100mg/L)于100mL容量瓶中,用水定容至刻度,配得巖藻糖,、阿糖醇,、海藻糖、甘露糖,、甘露醇,、葡萄糖、半乳糖,、核糖的質(zhì)量濃度為0.25mg/L,、0.50mg/L、1.00mg/L,、2.00mg/L,、5.00mL、10.00mL,、20.00mg/L和50.00mg/L的混合標準工作液,。臨用現(xiàn)配。
表1 標準系列曲線濃度梯度表
2．測試結(jié)果
2.1 巖藻糖,、阿糖醇,、海藻糖、甘露糖,、甘露醇,、葡萄糖、半乳糖,、核糖線性測試結(jié)果
依次移取0.25mg/L,、0.50mg/L、1.00mg/L,、2.00mg/L,、5.00mL、10.00mL,、20.00mg/L和50.00mg/L的系列標準工作曲線,，按照1.1工作測試條件得到標準曲線線譜圖多點重疊圖如圖1，果糖,、葡萄糖,、蔗糖、麥芽糖和乳糖在該色譜條件下線性相關(guān)系數(shù)R=0.999以上,，線性良好,。
圖1 食用菌中八種糖標準曲線重疊色譜圖
表2線性方程
2.2 巖藻糖、阿糖醇,、海藻糖,、甘露糖,、甘露醇、葡萄糖,、半乳糖,、核糖標準品譜圖
在1.1的工作測試條件下條件下，標準品進行檢測,。樣品圖譜如圖2,，所示樣品圖譜中的目標離子巖藻糖、阿糖醇,、甘露糖、甘露醇,、葡萄糖,、半乳糖峰形對稱，分離度良好,，最終得到樣品中巖藻糖,、阿糖醇、海藻糖,、甘露糖,、甘露醇、葡萄糖,、半乳糖,、核糖的含量。繡球菌中阿糖醇含量為0.48mg/g,，甘露醇含量為3.525mg/g,，巖藻糖含量為13.125mg/g，甘露糖含量為33.015mg/g,，葡萄糖含量為273.75mg/g,，半乳糖含量為29.415mg/g。
圖2 樣品測試譜圖
2.3 樣品加標回收重復性測試結(jié)果
分別向樣品加5mg/L,、10mg/L,、25mg/L的標準品，每個濃度3個平行樣品進行測定,，其測定譜圖分別如圖3-5所示,，其回收率在95.25％~105.94％。
圖三 樣品中加標5mg/L測試譜圖
圖四 樣品加標10mg/L測試重疊圖譜
圖五 樣品加標25mg/L測試重疊圖譜
2.4 檢出限測試
對0.25mg/L糖類標準品進行檢出限測定,，其信噪比在95~505之間,，大于3,圖六為樣品進一步稀釋后加標測試圖譜。
圖六 0.25mg/L標準品測試圖譜
表三 檢出限與定量限測定表
3. 結(jié)論
本次采用皖儀科技離子色譜儀IC6300系列對食用菌中的八種糖進行測試,，包含系統(tǒng)適用性,、標準曲線驗證,、重復性驗證、加標回收率,。測試結(jié)果峰形較好,，線性良好，重復性滿足要求,，靈敏度高完全滿足測試要求,。
7
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務