皖儀科技液相色譜測定人參中的人參皂苷
前言
人參皂苷是人參的重要活性成分,，屬于三萜類糖苷化合物，可分為原人參二醇組皂苷（PPD型皂苷）,、原人參三醇組皂苷（PPT型皂苷）和齊墩果烷型等,。目前，已從人參根中分離出40多種人參皂苷,。
人參皂苷具有抗氧化,、抗炎、血管舒張,、抗過敏,、抗糖尿病等多種治療作用。一些人參皂苷通過減少DNA損傷,、減少宿主對突變的易感性,、增加免疫監(jiān)測和細胞凋亡等顯示其抗癌特性。此外,，人參皂苷還能有效改善傳統(tǒng)化療藥物的療效,，防止對正常組織的損傷。
1 實驗方法
1.1 儀器配置
皖儀科技LC3200系列高效液相色譜儀
表1 高效液相色譜系統(tǒng)配置清單
1.2 測試條件
色譜柱：C18,5μm,4.6×250mm,；
柱溫：35℃,；
檢測波長：203nm；
流速：1.0mL/min,；
流動相：A:乙腈,；B:水
進樣量：10μL；
表2 梯度條件
1.3 儀器及試劑、耗材
試劑：甲醇：色譜純,；乙腈：色譜純,；標準物質(zhì)：人參皂苷Rg1、人參皂苷Re,、人參皂苷Rb1,；
輔助裝置：分析天平,；溶劑抽濾裝置,；超聲波清洗機；
實驗材料：濾膜：有機相濾膜,，水相濾膜0.45μm
1.4 對照品制備
n 人參皂苷Rg1對照品溶液：精密稱定人參皂苷Rg1對照品15.0mg,，置容量瓶中，用甲醇稀釋定容至10mL,，制成1.5mg/mL的標準溶液,。
n 人參皂苷Re對照品溶液：精密稱定人參皂苷Rg1對照品9.0mg，置容量瓶中,，用甲醇稀釋定容至10mL,，制成0.9mg/mL的標準溶液。
n 人參皂苷Rb1對照品溶液：精密稱定人參皂苷Rg1對照品15.0mg,，置容量瓶中,，用甲醇稀釋定容至10mL，制成1.5mg/mL的標準溶液,。
混合對照品溶液：分別取人參皂苷Rg1對照品,、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rb1對照品,，加甲醇制成每1mL中含人參皂苷Rg10.5mg,、人參皂苷Re0.3mg、人參皂苷Rb10.5mg的混合溶液,。
n 人參皂苷Rg1標準系列溶液：取人參皂苷Rg1對照品溶液稀釋制成1mg/L,、5mg/L、10mg/L,、25mg/L,、50mg/L、100mg/L,、500mg/L標準系列溶液,。
2 結(jié)果與討論
2.1 標準曲線
圖1人參皂苷Rg1標準曲線及相關(guān)系數(shù)
說明：人參皂苷Rg1標準曲線線性范圍較好，線性相關(guān)系數(shù)＞0.9999,。2.2 標準品
圖2 人參皂苷Rg1標準品色譜圖
表3 人參皂苷Rg1色譜參數(shù)
圖3 人參皂苷Rb標準品色譜圖
表4 人參皂苷Rb色譜參數(shù)
圖4 人參皂苷Rb標準品色譜圖
表5 人參皂苷Rb色譜參數(shù)
2.3 混標
圖5 人參皂苷混合標準品色譜圖
表6 人參皂苷混合標準品色譜參數(shù)
說明：由上述混標譜圖可見,，樣品分離較好，樣品分離度在2.2以上，滿足分離要求,。2.3 樣品重復(fù)性
圖6 人參皂苷混合標準品色譜圖
表7 人參皂苷Rg1,、Re、Rb1標準品重復(fù)性色譜參數(shù)
說明：重復(fù)性較好,，人參皂苷Rg1保留時間RSD值為0.437%,，峰面積RSD值為0.443%；人參皂苷Re保留時間RSD值為0.343%,，峰面積RSD值為0.396%,；人參皂苷Rb1保留時間RSD值為0.479%，峰面積RSD值為0.382%,。
3 結(jié)論
本次采用皖儀科技高效液相色譜儀配置二極管陣列檢測器,，依據(jù)《中國藥典》2020版對人參皂苷進行含量測定，由上述數(shù)據(jù)可知,，標準曲線線性范圍較好,，線性相關(guān)系數(shù)＞0.9999；人參皂苷Rg1,、人參皂苷Re,、人參皂苷Rb1理論塔板數(shù)分別為91232、46835,、192000,，符合藥典要求理論板數(shù)按人參皂苷Rg1峰計算應(yīng)不低于6000；重復(fù)性較好,，人參皂苷Rg1保留時間RSD值為0.437%,，峰面積RSD值為0.443%；人參皂苷Re保留時間RSD值為0.343%,，峰面積RSD值為0.396%,；人參皂苷Rb1保留時間RSD值為0.479%，峰面積RSD值為0.382%,；人參皂苷Rg1,、Re、Rb1對照品分離較好,，樣品分離度在2.2以上,，滿足分離要求。
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