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皖儀科技液相色譜

測定食物中四環(huán)素、土霉素,，助力食品安全

1 前言

四環(huán)素類(TCs)是由鏈霉菌產(chǎn)生或半合成的堿性廣譜抗生素，在20世紀(jì)40年代末首次被發(fā)現(xiàn),。在當(dāng)時,，TCs是一種很好的快速抑菌劑，甚至在高濃度下也有殺菌作用,?？咕V廣，可有效對抗多種革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌,、立克次體,、支原體、螺旋體等,，早在六七十年代就被廣泛使用,。其中金霉素、四環(huán)素,、土霉素因其廣譜,、使用方便、經(jīng)濟(jì)等,，在畜禽生產(chǎn)中被廣泛用作藥物添加劑,，用于防治禽畜腸道感染和促進(jìn)生長。

但四環(huán)素類獸藥易殘留于動物組織,、魚,、蛋、牛奶和蜂蜜等生物樣本中,，當(dāng)人長期食用含有四環(huán)素類獸藥殘留的食物后,，TCs會不斷在體內(nèi)蓄積，當(dāng)濃度達(dá)到一定量后,，就會對人體產(chǎn)生毒性作用,。所以,，對食物中四環(huán)素類抗生素的監(jiān)控檢測很有必要。本篇介紹的是用皖儀科技液相色譜儀檢測土霉素,、四環(huán)素的一種應(yīng)用方法,。

皖儀科技液相

2 方法原理

本方法參考的是GB 31658.6-2021標(biāo)準(zhǔn)，高效液相色譜-紫外法測定,，外標(biāo)法定量,。

3 儀器配置及實(shí)驗(yàn)方法

3.1 儀器配置

        皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列

3.2 實(shí)驗(yàn)方法

n  3.2.1 試劑和標(biāo)準(zhǔn)品制備

標(biāo)準(zhǔn)儲備液：精確稱取標(biāo)準(zhǔn)品土霉素、四環(huán)素各適量,，用甲醇溶解配置成1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液,。

混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別量取土霉素、四環(huán)素標(biāo)準(zhǔn)儲備液各100uL,，用800μL甲醇稀釋至1mL,，配制成100μg/mL混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：精密量取混合標(biāo)準(zhǔn)工作液適量,，用草酸溶液（0.01mol/L）稀釋成濃度為0.05μg/mL,、0.1μg/mL、0.5μg/mL,、1μg/mL,、2μg/mL、5μg/mL,、10 μg/mL,、20 μg/mL的系列混合標(biāo)準(zhǔn)液。

草酸溶液（0.01mol/L）：取草酸1.26 g,，用水溶解并稀釋至1000mL,。

三氟乙酸溶液：取三氟乙酸0.8mL，用水溶解并稀釋至1000mL,。

n  3.2.2 色譜條件

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.1 線性

               圖1 土霉素標(biāo)曲

               圖2 四環(huán)素標(biāo)曲

由上圖可知,，土霉素曲線R值為0.99997，四環(huán)素曲線R值為0.99976,，完全滿足實(shí)驗(yàn)要求,。

4.2 檢出限

根據(jù)上圖數(shù)據(jù)所示，濃度為0.1mg/L的標(biāo)準(zhǔn)品,，三倍信噪比為檢出限計算可知土霉素儀器檢出限為0.02mg/L,，四環(huán)素儀器檢出限為0.032mg/L。

4.3 重復(fù)性

               圖4 6針重復(fù)性譜圖

根據(jù)上表數(shù)據(jù)計算可知,，土霉素保留時間RSD為0.057%,，峰面積RSD為0.042%。四環(huán)素保留時間RSD為0.064%，峰面積RSD為0.047%,。

5  總結(jié)

本篇介紹的分析方法,，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置紫外檢測器測試土霉素、四環(huán)素,。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：土霉素,、四環(huán)素線性良好，R值均在0.999以上,。土霉素儀器檢出限為0.02mg/L,，四環(huán)素儀器檢出限為0.032mg/L。土霉素保留時間RSD為0.057%,，峰面積RSD為0.042%,。四環(huán)素保留時間RSD為0.064%，峰面積RSD為0.047%,。以上各項數(shù)據(jù)結(jié)果滿足標(biāo)準(zhǔn)方法中對儀器的要求,。