1. 預(yù)期用途

安瓿含有從 EBV 轉(zhuǎn)化細(xì)胞系中提取的凍干純化 gDNA 樣品,。它們旨在用作脆性 X 綜合征基因檢測的參考組。該專家組于 2008 年由世界衛(wèi)生組織 (WHO) 生物標(biāo)準(zhǔn)化專家委員會 (ECBS) 成立,，是第一個脆性 X 綜合征國際遺傳參考專家組,。注：這些材料不得用于任何其他用途。,、

2. 注意

NIBSC 08/158 脆性X綜合征gDNA(標(biāo)準(zhǔn)品) 不適用于人類食物鏈中的人類或動物,。

每種材料都經(jīng)過 PCR 檢測，發(fā)現(xiàn) HIV1,、HTLV1,、HBV 和 HCV 均為陰性。與所有生物來源的材料一樣,，這種制劑應(yīng)被視為對健康有潛在危害,。應(yīng)根據(jù)您自己實驗室的安全程序使用和丟棄它。此類安全程序應(yīng)包括戴防護手套和避免產(chǎn)生氣溶膠,。打開安瓿或小瓶時應(yīng)小心謹(jǐn)慎,，以免割傷。

3. 單元

沒有分配給這些材料的單元,。

4. 內(nèi)容

生物材料原產(chǎn)國：英國,。

使用“鹽析"方法提取 DNA 樣品，并在冷凍干燥前懸浮在含有 2.5 mg/ml 海藻糖作為賦形劑的 Tris/EDTA 緩沖液中,。該面板包括五個單獨編碼的安瓿,，每個安瓿含有大約 23 µg 人類 gDNA；

07/120 雌性,，野生型,，

07/122 女性，突變前,，

07/168 女性,，全突變，

07/170 男性,，全突變,，

07/174 男性，突變前

該小組在一項涉及 21 個實驗室的國際合作研究中進(jìn)行了測試，并在 FMR1 基因的 5' 非翻譯區(qū)獲得了以下數(shù)量的 CGG 重復(fù)：材料 CGG 重復(fù)范圍平均值

07/120 19-24, 28-33 22, 31

07/122 30-36, 100-132 33, 113

07/168 33-41, 300-401 38, 346

07/170 353-960 754

07/174 97-127 114

此外,，兩個實驗室在 07/170 男性全突變樣本中檢測到 7 個 CGG 重復(fù),。

5. 存儲

將所有未開封的凍干制劑安瓿存放在 -20°C 或以下。

請注意：由于凍干材料固有的穩(wěn)定性,，NIBSC 可能會在環(huán)境溫度下運輸這些材料,。

6. 開瓶指南

NIBSC 08/158 脆性X綜合征gDNA(標(biāo)準(zhǔn)品)  DIN 安瓿瓶有一個“易開"顏色的壓力點，窄的安瓿桿在此與較寬的安瓿瓶主體相連,。各種類型的安瓿破碎機可商購獲得,。要打開安瓿，輕輕敲擊安瓿以收集底部（標(biāo)記）端的材料,，并按照安瓿破碎器隨附的制造商說明進(jìn)行操作,。

7. 材料的使用

在重新配制之前，不應(yīng)嘗試稱量凍干材料的任何部分,。

a,。如上文第 6 節(jié)所述打開安瓿瓶。

b,。在室溫下用 40 µL 無菌無核酸酶水復(fù)溶凍干材料,。

C。將全部內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到無核酸酶管中,。

d,。讓材料在室溫下復(fù)溶 1 小時，并在使用前用移液管充分混合,。

e.使用前測量 DNA 濃度,。

F。我們建議在重構(gòu)后直接使用該材料,，并且不要將其儲存超過這一點,，但如果需要,，如果樣品要在 3個月,。如需較長時間，請在 -20°C 或更低溫度下分裝保存,。應(yīng)注意避免與其他樣品交叉污染,。