Xdrop單細胞包裹和分選系統(tǒng)

一、概述：

Xdrop單細胞包裹和分選系統(tǒng)提供一個經(jīng)濟高效的單細胞分辨率的功能分析解決方案,。Xdrop支持將活細胞封裝在高度穩(wěn)定的雙乳化,、單乳化液滴中。

Xdrop 的微流體儀器,它能夠以單細胞分辨率對細胞進行快速準確的功能分析,。Xdrop 將活細胞和反應(yīng)性分子封裝在高度穩(wěn)定的雙乳化液滴中,這些液滴充當(dāng)孵育過程中細胞與細胞和細胞與分子快速相互作用的微環(huán)境,。液滴適用于流式細胞術(shù)和分選。有限的體積迫使快速相互作用并導(dǎo)致分泌的物質(zhì)迅速增加到可檢測的水平,這意味著更短的篩選時間,。將細胞群分離成含有單細胞且無串?dāng)_的液滴意味著您可以獲得細胞異質(zhì)性活動或效力的高度準確的單細胞分辨率結(jié)果,而不是隱藏關(guān)鍵信息的平均讀數(shù)。

提供高通量（數(shù)百萬個至qian萬級）皮升微反應(yīng)空間環(huán)境（或細胞微環(huán)境）,，提高活細胞功能分析的速度和準確性,，可用于細胞原位分析、孵化及下游分析（功能測定,、孵育,、表型分析和篩選等等）。

Xdrop旨在提高對細胞的高分辨率分析能力,，通過將傳統(tǒng)細胞樣品分析方式轉(zhuǎn)變?yōu)橐旱蝺?nèi)單細胞高分辨率和高靈敏單細胞

樣品形式分析,，提高活細胞功能分析的速度和準確性，從而變革您分析細胞的傳統(tǒng)方式,。

專用的雙乳化試劑盒高通量液滴包裹細胞,，40分鐘內(nèi)生成高達6400萬個雙乳化液滴，液滴穩(wěn)定,，可存儲數(shù)月之久,，也可在CO2培養(yǎng)器中進行培養(yǎng)。

用于細胞的皮升微反應(yīng)空間環(huán)境(或細胞微環(huán)境)：

Xdrop 產(chǎn)生兩種尺寸的雙乳液液滴,。Xdrop DE20 Cartridge 產(chǎn)生較小的液滴,直徑約 20um(體積:約 1.5 皮升),適用于微生物細胞工作流程,。Xdrop DE50 Cartridge 產(chǎn)生更大的尺寸,直徑約 50um(體積:約 100 皮升),適用于哺乳動物細胞工作流程。

上圖為Xdrop DE20 Cartridge 上的通道,試劑在其中混合形成直徑約 20 um 的液滴

細胞在 DE20 和 DE50 液滴中很開心

細胞被包裹在生長培養(yǎng)基的液滴中。二氧化碳和水等小分子可以擴散穿過屏障,。然而,大而復(fù)雜的分子,如細胞因子和酶,仍留在液滴內(nèi),。

                     上圖為Xdrop DE50 Cartridge頂部和底部,試劑在其中混合形成 50um直徑液滴

二、系統(tǒng)優(yōu)點：

系統(tǒng)生成的雙乳液液滴充當(dāng)皮升大小的反應(yīng)室或細胞微環(huán)境,，使您能夠:

1,、可形成超穩(wěn)定的雙乳化液滴（液滴穩(wěn)定可存儲數(shù)月之久,也可在CO2 培養(yǎng)器中進行培養(yǎng)）；

2,、皮升微反應(yīng)空間環(huán)境：可在皮升級液滴微空間內(nèi),，加速反應(yīng)動力學(xué)過程，快速,、靈敏分析優(yōu)勢,；

3、專有配方的液滴包裹的表面活性劑,，不含有動源成分,能保障哺乳動物細胞的長時間高存活率,；

4、能加速的反應(yīng)動力學(xué)過程的雙乳化液滴包裹技術(shù),；

5,、通過提高細胞間相互作用或細胞分泌物積累的速率來加速工作流程；

6,、獲得揭示功能異質(zhì)性的單細胞視圖,；

7、在我們的臺式儀器上使用簡單的方案大大簡化工作流程,；

8,、使用適當(dāng)?shù)姆诌x技術(shù),回收具有所需特性的細胞。

三,、該系統(tǒng)支持哪些分析：

該系統(tǒng)已在一系列單細胞分辨率功能分析中證明了其性能,包括:

• 人體免疫細胞殺傷細胞

• 哺乳動物細胞分泌細胞因子

• 微生物細胞的酶分泌

這顯示了我們的儀器在工程細胞治療研究,、分子工程、合成生物學(xué)和微生物研究方面的潛力,。

圖為:雙乳液液滴中表達纖維素酶的大腸桿菌細胞的明場(頂部)和合并的明場和熒光(底部)圖像(由亞琛工業(yè)大學(xué)施瓦內(nèi)貝格集團提供)

四,、典型應(yīng)用示例但不限于:

   細胞樣品單細胞化處理(雙乳化液滴包裹)和單細胞功能分析、功能測定,、孵育,、表型分析和篩選：

1) 在細胞群中定量活性地自然殺傷細胞

使用Xdrop®雙乳化液滴工作流程快速定量活性殺傷細胞。

 Xdrop使用微液滴反應(yīng)器（細胞微環(huán)境）的單個細胞分析形式,，更能體現(xiàn)細胞群的異質(zhì)性,、定量分析、回收和擴增,。

 在雙乳化液滴中孵育1小時內(nèi)就可以看到明顯的靶細胞被殺傷的結(jié)果,。在提升研究工程化免疫細胞能力方面該Xdrop向前邁出了重要一步,。

2) 識別強效細胞因子分泌源(分泌細胞)、并能成功地分選和擴增這些細胞

能夠識別出高效分泌細胞（如分泌IFN-γ的NK-92細胞）,，并成功地分選和擴增這些細胞,。這是進行細胞因子分泌分析的一種方法，可在短時間內(nèi)（7小時內(nèi)）為活細胞提供單細胞水平上的分析結(jié)果,。

3) 細胞因子γ-干擾素(IFN-γ)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的多重分析  

可實現(xiàn)對細胞群中能分泌一種或多種細胞因子的免疫細胞進行快速,、多重的定量分析。多重和單次測定結(jié)果一致,，重現(xiàn)性好,。實現(xiàn)在單細胞水平上測量細胞因子分泌情況?？梢栽谝粋€工作日（8小時）內(nèi)同時研究一個或多個細胞因子的分泌情況,。

Xdrop 是一種多功能且用戶友好的儀器,用于制備 DNA、細胞和其他生物材料以進行高分辨率下游分析,。

它安全快速地將單個分子,、DNA 片段、單個細胞或單個細胞器連同測定化學(xué)物質(zhì)一起封裝在高度穩(wěn)定的雙乳液或單乳,，

液液滴中,。這些液滴通過 PCR、渦旋,、孵育和長期儲存是穩(wěn)定的 結(jié)合適當(dāng)?shù)囊旱畏诌x,、測序和分析技術(shù),

Xdrop 應(yīng)用包括:

- 長讀或短讀測序

- CRISPR 基因編輯的靶向評估

- 無偏見的整體基因組擴增

- 細胞分泌物的單細胞檢測

- 單細胞酶活性評估使用 Xdrop,

更多詳細、應(yīng)用,，請聯(lián)系我們