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新西蘭兔復(fù)發(fā)性口腔潰瘍模型
人類復(fù)發(fā)性口腔潰瘍(Recurrent Aphthous Ulcer, RAU)是臨床上常見的口腔黏膜疾病,,其發(fā)病原因至今尚不明確,。近年來大多數(shù)研究報道均認為,,其與機體免疫(尤其是自身免疫)有關(guān),因此建立理想而合適的復(fù)發(fā)性口腔潰瘍(RAU)動物模型意義重大,。由于受到人們對 RAU病因?qū)W方面認識的限制,,迄今為止臨床上尚無治療RAU的te效藥及方法。采用免疫學方法復(fù)制的本模型,,其疾病發(fā)作特點,、口腔黏膜病理損傷與臨床上人類RAU極其相似,鏡下均表現(xiàn)為非特異性炎癥,。本方法建立的免疫性RAU模型,,其制作機制可能是特異性蛋白作為抗原進入機體后,產(chǎn)生了特異性抗體而誘發(fā)動物口腔黏膜免疫反應(yīng)的結(jié)果,。本模型可用作人類RAU發(fā)病機制及藥物治療方面的實驗研究,。
復(fù)發(fā)性口腔潰瘍兔子模型
動物品系:新西蘭兔,,1.5~2.0kg
實驗分組:正常對照組、模型組,、陽性藥組,、受試藥組低、中,、高三個劑量組
實驗周期:6~8weeks
建模方法:首先將透析袋放入0.5mol/L的EDTA溶液中,,煮0.5h后棄去溶液,更換蒸餾水再煮3次,,然后貯存在含0.01%疊氮鈉的蒸餾水中,,4℃保存?zhèn)溆谩S寐樽矸椒毙蕴幩篮?,剝離其口腔黏膜組織,,用勻漿器制備勻漿后,超聲波震蕩,,低溫離心,,保留沉淀物,取上清液再作透析以濾過小分子物質(zhì),,將大分子蛋白留于透析袋內(nèi),。透析過程同法反復(fù)5次,最后將袋內(nèi)物質(zhì)冷凍干燥,,獲得粉末狀蛋白作為抗原,,置-70℃低溫冰箱備用。取1.5~2.0kg體重的新西蘭兔,,用預(yù)先提取的口腔黏膜蛋白12.5mg溶于0.5ml磷酸緩沖液中,,再加入0.5ml的wan全弗氏佐劑呈乳化液。在家兔脊柱兩側(cè)皮內(nèi)注射上述組織乳化液1ml,,共注射20點,。每隔2周同法注射1次,共注射5次,。于不同時間切取口腔黏膜作常規(guī)病理組織切片光鏡下檢查,。
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