與當前方法比較

什么是轉染,？

轉染是將遺傳物質輸送到細胞中的過程。從廣義上講,，有兩種主要方法：  轉染（非病毒）與轉導（病毒性的）,。

到目前為止，常見的基因編輯方法是通過使用病毒載體（即使用病毒將 DNA 傳遞到細胞內）,，也稱為轉導,。病

毒載體有在患者中引起嚴重免疫反應的風險，在過去的幾項臨床試驗中,，許多死亡都歸因于此,。然而，病毒載體也

帶來了巨大的制造挑戰(zhàn),，因為除了細胞作為起始材料外,，生產過程還必須考慮到高度復雜的病毒載體原材料。許多

行業(yè)參與者現(xiàn)在認識到,，長期,、成功的非病毒轉染方法對制造的挑戰(zhàn)將更小,。 

因此,，轉向非病毒轉染方法，特別是電穿孔（向細胞施加電場以增加細胞膜的通透性,，允許將 DNA 引入細胞）在

制造能力方面正在積聚動力：提高可重復性和質量控制,。近年來,，電穿孔變得越來越流行，因為它在轉染較大的基因

編輯時比病毒轉導更有效，

這在使用 CRISPR 技術時也更常見,。市場上十分受歡迎的電動工具之一是Lonza 的 Amaxa Nucleofector,。然而，電穿孔仍然存在挑戰(zhàn),，特別是原代細胞,，如 T 細胞、B 細胞或干細胞,，難以轉染,。

確定轉染效率的問題

電穿孔后，細胞通常被鍍在 96 孔板中,。1-2 天后,，成功轉染的細胞開始表達感興趣的受體。這些細胞受體用

熒光染料/染色劑或磁珠標記,，使熒光流式細胞儀能夠分析和量化成功轉染（即基因工程）的細胞,。