人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞（永生化）

（Human Endometrial Epithelial Cells ）

人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞（永生化）

　　細(xì)胞凍存

　　（1）細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,，細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行細(xì)胞凍存。首先,，棄去培養(yǎng)上清,，用PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

　?。?）加1-2ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加與消化液等體積的含10%血清的完*培養(yǎng)基終止消化,。

　?。?）輕輕吹打細(xì)胞，待細(xì)胞完*脫落后吸出,，1000rpm離心5分鐘,。

　　（4）棄去上清液,，往細(xì)胞沉淀中加入1ml/支的立譜沃無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：PZ110R）,，混勻后加入凍存管中。（例如：凍存2支細(xì)胞,，加入2mL無(wú)血清凍存液）

　?。?）將凍存細(xì)胞直接放入－80℃冰箱即可（如果追求更理想的細(xì)胞復(fù)蘇率，也可選擇使用程序降溫盒）,，如后期要將細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,，需在-80℃冰箱存放24小時(shí)以上,。