細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)是新一代細(xì)胞克隆篩選和挑取技術(shù),，細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)能夠更少時(shí)間里，自動(dòng)化篩選并挑取更高水平表達(dá)的細(xì)胞克隆,，擁有5組熒光通道,，可以同時(shí)使用3組，細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)避免有限稀釋,，快速篩選挑取雜交瘤克隆，建立穩(wěn)定細(xì)胞株,，干細(xì)胞及特殊表面標(biāo)記細(xì)胞挑取及昆蟲(chóng)細(xì)胞篩選挑取,。

 

　　細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)的加藥時(shí)間和維持濃度的確定方法：

　　1，由于基因轉(zhuǎn)染到細(xì)胞內(nèi)之后要一段時(shí)間才能表達(dá)出蛋白質(zhì),。所以篩選不能太早,；但是也不能太晚，因?yàn)檗D(zhuǎn)染了外源基因的細(xì)胞代謝負(fù)荷較大,，增值較慢,，時(shí)間長(zhǎng)了就會(huì)被沒(méi)有外源基因轉(zhuǎn)入的細(xì)胞所淹沒(méi)，導(dǎo)致篩選不出陽(yáng)性克隆,，一般要在轉(zhuǎn)染24小時(shí)之后才開(kāi)始加G418篩選,。隨著細(xì)胞的代謝G418的濃度和活性都回下降，所以每3~5天都要更換一次含有G418的篩選液,。這時(shí)藥物濃度可以降至200ug/ml,。

　　2，加抗生素的時(shí)機(jī),，主要是考慮插入到細(xì)胞基因組的抗性基因是否已經(jīng)得到表達(dá),。一般是轉(zhuǎn)染48小時(shí)后加入抗生素。挑出單克隆后就可以用維持濃度,，一般是篩選濃度的1/2,。關(guān)于維持濃度，有人說(shuō)細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)對(duì)抗生素的抗性,，應(yīng)不斷提高其濃度,。而且，如果你要挑選到幾個(gè)陽(yáng)性克隆中較高表達(dá)的克隆的話,，可以調(diào)整抗生素的濃度,。當(dāng)然,，抗性基因高表達(dá)，目的基因不一定就跟著高表達(dá),。

 

　　細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)的有限稀釋法是目前常用的一種常規(guī)方法,，這種方法篩選細(xì)胞的好處就是基本上不會(huì)傷害細(xì)胞。整個(gè)過(guò)程中細(xì)胞所經(jīng)歷的,，也僅僅是在移液槍頭中的短暫停留,，因此幾乎是零損傷。不過(guò),，這種方法的弊端也是顯而易見(jiàn),，就是效率問(wèn)題。