基因電轉(zhuǎn)染儀作為物理方法的一種,，不僅能將DNA,、RNA,，還能將抗體,、酶及其他生物活性分子轉(zhuǎn)入細(xì)菌、酵母,、動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞,。它是一種簡(jiǎn)便的基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)，具有其他轉(zhuǎn)移方法不能對(duì)比的*性,，如操作簡(jiǎn)便,、快捷，可重復(fù)性強(qiáng),，轉(zhuǎn)染率高,，適用廣譜等，尤其對(duì)目前一般認(rèn)為難轉(zhuǎn)的懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也能獲得較高的轉(zhuǎn)染,。

 

　　電穿孔法是通過(guò)電場(chǎng)作用于細(xì)胞幾微秒到幾毫秒之后,，在細(xì)胞膜上暫時(shí)形成小孔或開口，把大分子如DNA等導(dǎo)入細(xì)胞并進(jìn)入細(xì)胞核的技術(shù),。其過(guò)程簡(jiǎn)述如下：首先在電擊過(guò)程中,，細(xì)胞膜上出現(xiàn)穿孔，質(zhì)粒在電泳力的作用下與細(xì)胞膜接觸，并在細(xì)胞膜上電穿孔的區(qū)域形成一種可轉(zhuǎn)移的復(fù)合物,。再次電擊后,，質(zhì)粒脫離復(fù)合物并擴(kuò)散至細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，開始瞬轉(zhuǎn),；同時(shí)小部分質(zhì)粒進(jìn)入核內(nèi)與染色體整合,，開始穩(wěn)轉(zhuǎn)。一旦DNA擴(kuò)散至細(xì)胞,，膜上小孔會(huì)關(guān)閉,。

 

　　淺析基因電轉(zhuǎn)染儀脈沖過(guò)程：

　　1）脈沖波形

　　脈沖波形主要分為兩種：1、方波脈沖,；2,、指數(shù)遞減波脈沖。方波脈沖是指：電壓瞬間升至預(yù)設(shè)電壓,，保持電壓放電,，然后瞬間終止放電。一般哺乳動(dòng)物細(xì)胞電轉(zhuǎn)染時(shí)選擇方波脈沖,，有較高的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞存活率,。指數(shù)遞減波脈沖是指：先對(duì)電容充電，然后讓電容*放電,，其電壓變化呈指數(shù)遞減,。一般這種波形的脈沖電轉(zhuǎn)染適用于細(xì)菌、酵母菌,、昆蟲細(xì)胞,。

　　2）脈沖時(shí)間

　　脈沖時(shí)間的選定主要取決與脈沖波形。在方波脈沖中,，脈沖時(shí)間可直接設(shè)定,。在指數(shù)遞減波脈沖中，脈沖時(shí)間是指電壓衰減至初始電壓1/3時(shí)所用的時(shí)間,，等于電容（C）與電阻（R）的乘積,，單位是ms。在參數(shù)優(yōu)化中,，增加電壓應(yīng)當(dāng)降低脈沖時(shí)間,，而減小電壓則應(yīng)當(dāng)增大脈沖時(shí)間。