梅里埃革蘭氏陰性細(xì)菌鑒定卡GN說明書：

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：革蘭氏陰性細(xì)菌鑒定卡

英文名稱：VITEK 2 Gram-Negative Identification Card (VITEK 2 GN Test Kit)

【包裝規(guī)格】

20 測試/盒

【預(yù)期用途】

該產(chǎn)品用于自動(dòng)鑒定有臨床意義的發(fā)酵和非發(fā)酵革蘭陰性桿菌,。

該產(chǎn)品與 VITEK® 2 系統(tǒng) 一起使用用于自動(dòng)鑒定大多數(shù)有臨床意義的發(fā)酵和非發(fā)酵革蘭陰性桿菌,。革蘭氏陰性細(xì)菌鑒定卡（以下簡稱 GN 卡）僅供一次性使用,，該卡能鑒定的細(xì)菌見附表 1：GN 卡鑒定的細(xì)菌,。

【檢驗(yàn)原理】

GN 卡根據(jù)已有的生化方法 1,2,4,8-9,10,11,12,17,18,20,21,24,25,27,，和新研發(fā)的底物來檢測碳源的利用、酶活性和耐

藥性,?？ㄆ嫌?47 個(gè)生化試驗(yàn)，一個(gè)陰性對照孔,。脫羧酶陰性對照孔（52 號孔）用來作為脫羧酶試驗(yàn)的基礎(chǔ)值參考,。最終結(jié)果可于 10 小時(shí)內(nèi)獲得。

【主要組成成份】

詳見附表 2：GN 反應(yīng)孔內(nèi)容物。

注：表中未注明的編號在 1 和 64 之間的其它反應(yīng)孔為空白,。

【儲存條件及有效期】

在 2℃～8℃的條件下封閉儲存于原包裝盒內(nèi),。有效期 12 個(gè)月。

生產(chǎn)日期：詳見外包盒標(biāo)簽,。

有效期至：詳見外包盒標(biāo)簽,。

【適用儀器】

全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析儀（VITEK 2 System）型號：VITEK 2， VITEK 2 XL

全自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)（VITEK 2 Compact System）型號：VITEK 2 Compact

GN 卡與 VITEK 2 儀器配合使用,，可作為日常常見的發(fā)酵和非發(fā)酵革蘭陰性菌鑒定的完整系統(tǒng),，所需

材料如下：

? VITEK® 2 GN 卡

? VITEK® 2 DENSICHEK 電子比濁儀或 VITEK® 2 DENSICHEK 常見套件

? DensiCHEK Plus Standards Kit 電子比濁儀標(biāo)準(zhǔn)濁度管或 DENSICHEK 管 K 標(biāo)準(zhǔn)套件

? VITEK® 2 卡架

? 樣本稀釋液（0.45%～0.50%NaCl, pH4.5～7.0）

? 12mm×75mm 清潔一次性塑料管（聚苯乙烯）

? 無菌棒或拭子

? 合適的瓊脂培養(yǎng)基（參見附表 3：培養(yǎng)要求表）

可選配件：

? 容積可調(diào)式鹽水分配器

? 接種環(huán)

? 預(yù)裝樣本稀釋液的試管（0.45% 至 0.50% NaCI 溶液，pH 4.5 至 7.0）

? 試管蓋

? 渦旋震蕩器

【樣本要求】

欲詳細(xì)了解樣本準(zhǔn)備信息,，請參見附表 3：培養(yǎng)要求表,。

革蘭氏陰性細(xì)菌鑒定卡GN檢驗(yàn)方法：

警告：未遵守本部分有關(guān)執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室任務(wù)的說明和建議，可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤或延遲,。欲詳細(xì)了解產(chǎn)品具體信息,，請參見培養(yǎng)要求表。

見適用儀器使用手冊,。

注：按標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室規(guī)程用純培養(yǎng)物制備接種物,，如果是混合培養(yǎng)物，需重新進(jìn)行分純,。建議使用菌純度確認(rèn)平板，以確保用于試驗(yàn)的是純培養(yǎng)物,。

1） 完成以下某項(xiàng)操作：

• 如果符合培養(yǎng)要求,，從原代培養(yǎng)板上選擇分離的菌落。

• 將要測試的細(xì)菌轉(zhuǎn)移至適當(dāng)?shù)沫傊囵B(yǎng)基上傳代培養(yǎng)和相應(yīng)孵育,。

2） 以無菌方法,，將 3.0mL 無菌鹽水（0.45%至 0.50%NaCl 溶液，pH 4.5 至 7.0）加入一個(gè)透明的塑料（聚苯乙烯）試管（12 mm x 75 mm）中,。

3） 用無菌棒或拭子向在第 2 步中準(zhǔn)備的鹽水試管挑取足量形態(tài)類似的菌落,。用經(jīng)過校準(zhǔn)的 VITEK® 2 DensiCHEK™ Plus 或 VITEK® 2 DensiCHEK™按相當(dāng)于 McFarland No. 0.50 至 0.63 的濁度準(zhǔn)備均質(zhì)菌懸液。

注：配置好的菌懸液在接種試卡前,，放置不能超過 30 分鐘,。

4） 將菌懸液試管和 GN 卡放入卡架中。

5） 參閱適當(dāng)?shù)膬x器使用手冊,，了解數(shù)據(jù)輸入說明和如何向儀器中裝載卡架,。

6） 丟棄危險(xiǎn)性廢物時(shí)請遵循所在地監(jiān)管機(jī)構(gòu)的指南。

質(zhì)量控制

質(zhì)控株與其期望結(jié)果列于 VITEK 2 GN 質(zhì)控表中,，根據(jù)本文件中規(guī)定的試驗(yàn)菌株操作質(zhì)量控制,。

認(rèn)證聲明

茲此證明, bioMerieux 符合 ISO 13485 和 FDA 質(zhì)量體系規(guī)范（QSR）關(guān)于微生物鑒定系統(tǒng)設(shè)計(jì)、開發(fā)和制造的要求。

試驗(yàn)頻率

目前,，建議遵循監(jiān)管機(jī)構(gòu)有關(guān)鑒定產(chǎn)品試驗(yàn)頻率指南,。

通常做法是，在收到試劑盒時(shí)實(shí)施 QC,。反應(yīng)必須符合使用說明結(jié)果,。

如果結(jié)果不符合這些標(biāo)準(zhǔn)，可以傳代培養(yǎng)分純,，重復(fù)試驗(yàn),。如果結(jié)果仍然不符合標(biāo)準(zhǔn)，采用其它鑒定方法,，并聯(lián)系 bioMerieux,。

質(zhì)控菌試驗(yàn)和儲存

? 依廠商說明復(fù)溶菌株；

? 采用含 5%羊血的大豆瓊脂 (TSAB),。在需氧條件下以 35℃至 37℃溫度孵育約 18 至 24 小時(shí),；

? 檢查純度。實(shí)施第二次傳代培養(yǎng),，以便試驗(yàn),。

? 采用含 5%羊血的大豆瓊脂 (TSAB)。在需氧條件下以 35℃至 37℃溫度孵育約 18 至 24 小時(shí)

儲存條件

短期保存條件

1） 以劃線方式接種至 TSAB 平板或斜面上,；35℃～37℃孵育 24 小時(shí),；

2） 2℃～8℃冷藏至多 2 周；

3） 按上述要求傳代培養(yǎng)一次,，以便用于質(zhì)量控制,。

長期保存條件

1） 用含 15% 甘油的大豆肉湯(TSB)配制濃菌懸液；

2） - 70℃冷凍保存,；

3） 實(shí)施質(zhì)量控制之前,，用 TSAB 實(shí)施兩次傳代培養(yǎng)。

注：避免反復(fù)凍融,，把冷凍保存菌株分裝為單份使用或用無菌棒從冷凍保存的菌中取出少部分使用,。

精簡質(zhì)量控制

注：只限工業(yè)使用的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該遵循精簡質(zhì)量控制部分中的內(nèi)容實(shí)施質(zhì)量控制。這些用戶無需額外試

驗(yàn),。

因?yàn)椴缓菀自谶\(yùn)輸條件下降解的底物,，可以通過試驗(yàn)兩個(gè)菌株實(shí)施精簡質(zhì)量控制：在 GN上，一個(gè)在大多數(shù)情況是陽性,，另外一個(gè)在大多數(shù)情況是陰性,。請參見 GN 質(zhì)量控制表。

全面質(zhì)量控制

不符合精簡質(zhì)量控制測試要求的客戶,，需要實(shí)施全面質(zhì)量控制試驗(yàn),，以便證明針對某鑒定產(chǎn)品的每種底物的陽性和陰性反應(yīng),。

欲在開始就符合精簡質(zhì)量控制測試要求，CLSI® M50-A 標(biāo)準(zhǔn)要求用戶實(shí)施和記錄以下兩項(xiàng)中的一項(xiàng)：5

•完成驗(yàn)證試驗(yàn),，以證明其性能符合制造商聲稱的性能,。

•實(shí)施全面質(zhì)量控制測試，應(yīng)該在至少三個(gè)不同季節(jié)至少對三批產(chǎn)品實(shí)施,。

請參閱完整的 CLSI® M50-A 標(biāo)準(zhǔn),，了解如何保持符合要求，以及精簡質(zhì)量控制測試對于用戶和制造商雙方的要求和責(zé)任,。

GN 質(zhì)量控制表

Enterobacter hormaechei 霍氏腸桿菌 ATCC® 700323™（用于精簡或全面質(zhì)量控制)

Stenotrophomonas maltophilia 嗜麥芽窄食單胞菌 ATCC® 17666™（用于精簡或全面質(zhì)量控制)

Acinetobacter baumannii 鮑曼不動(dòng)桿菌 ATCC® BAA-747™（用于全面質(zhì)量控制)

Elizabethkingia meningoseptica 腦膜膿毒性伊麗莎白金菌 ATCC® 13253（用于全面質(zhì)量控制)

Klebsiella oxytoca 產(chǎn)酸克雷伯菌 ATCC® 700324™（用于全面質(zhì)量控制)

Ochrobactrum anthropi 人蒼白桿菌 ATCC® BAA-749™（用于全面質(zhì)量控制)

Proteus vulgaris 普通變形菌 ATCC® 6380™ (用于全面質(zhì)量控制)

Pseudomonas aeruginosa 銅綠假單胞菌 ATCC® 9721™ (用于全面質(zhì)量控制)

Pseudomonas aeruginosa 銅綠假單胞菌 ATCC® BAA-1744™ (用于全面質(zhì)量控制)

注：Pseudomonas aeruginosa 銅綠假單胞菌 ATCC® BAA-1744™ 可能含有兩種形態(tài)各異的菌落,，但做質(zhì)控時(shí)兩種菌落都符合預(yù)期反應(yīng)結(jié)果,。

適用于 7.01 軟件用戶

Shigella sonnei 索氏志賀菌 ATCC®25931™（用于全面質(zhì)量控制）

適用于 8.01 或以上軟件版本用戶

Escherichia coli 大腸埃希菌 ATCC®25922™（用于全面質(zhì)量控制）

鑒定質(zhì)量控制細(xì)菌時(shí),，GN 卡的結(jié)果通常是單選，或在低分辨率或相似細(xì)菌鑒定結(jié)果內(nèi),。由于是根據(jù)反應(yīng)性能而不是鑒定性能選擇的質(zhì)控菌株,，因此，在所有預(yù)期質(zhì)量控制反應(yīng)均正確時(shí),，可能會(huì)出現(xiàn)不能鑒定或鑒定錯(cuò)誤的結(jié)果,。