優(yōu)級新生牛血清|新西蘭血清為動物來源,,成分復(fù)雜,,不同批次間會存在一些外觀上的差別,。一般情況下,,它們的顏色可能是金黃色,、紅色、琥珀棕色或者是介于三者之間,。未拆封的血清應(yīng)存放于-15至-20℃,,避免反復(fù)凍融。拆封后的血清應(yīng)無菌分裝成一次的用量并存放于-15至-20℃,,在產(chǎn)品質(zhì)量證書標(biāo)識的效期內(nèi)均可使用,。
優(yōu)級新生牛血清|新西蘭血清多種原因可能導(dǎo)致絮狀沉淀的形成,常見的原因之一是融化過程中,,脂蛋白聚集所致,。該現(xiàn)象一般不會影響產(chǎn)品質(zhì)量??梢?00g離心5分鐘,,取上清,然后過濾。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,,一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜,。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清,。
一,、為什么存放于冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀?如何避免該現(xiàn)象,?
在2-8°C條件下存放,優(yōu)級新生牛血清|新西蘭血清中的多種蛋白或脂蛋白會形成肉眼可見的沉淀,,如血纖蛋白(fibrin),,單體時處于溶解狀態(tài),在凍融過程中會發(fā)生聚集,,形成肉眼可見的沉淀,。但該現(xiàn)象一般不會影響血清的性能??梢?00g離心5分鐘,,取上清,然后過濾,。根據(jù)需要選擇合適的濾膜孔徑,,一般常用的是0.22um PES材質(zhì)的濾膜。為避免濾膜阻塞,,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾而不是直接過濾血清,。為盡量避免出現(xiàn)上述現(xiàn)象,建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,,避免反復(fù)凍融和融化后的血清在2-8°C條件下長時間放置,。
二、血清是否需要做滅活處理,?
這取決于您的應(yīng)用,。
滅活過程中,會導(dǎo)致血清中某些成分被破壞,,如氨基酸,,維生素,生長因子等,。所以只有在您的實驗對血清有特殊要求時,,才會考慮對血清進行滅活處理。如您的實驗對血清中的某種組分敏感,,需要去除該組分,。常見的情況是需要去除血清中的補體蛋白,因為補體在機體中參與細(xì)胞殺傷,巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞活化,,肥大細(xì)胞和血小板組胺釋放,,平滑肌收縮等過程,所以一般在免疫學(xué)相關(guān)研究中及肌細(xì)胞和干細(xì)胞的培養(yǎng)過程中需要對血清進行滅活處理,。
三,、如何進行血清滅活處理?
血清請先按上述“血清應(yīng)如何融解”中的操作步驟融化和混勻,,熱滅活時請將血清置于56℃水浴30分鐘,。為盡量減少熱滅活對血清品質(zhì)的影響,一次滅活的血清體積不宜過大,。準(zhǔn)備同樣的容器裝相等體積的水(與血清相同溫度),,滅活時將裝有血清和水的容器同時放入56℃水浴, 在裝水的容器中放置溫度計,加熱過程中不時輕輕旋轉(zhuǎn)混勻血清,,當(dāng)溫度計顯示達到56℃左右,,開始計時。56 ℃水浴后,,建議馬上轉(zhuǎn)移到冰上降溫,。
四、為什么需要對血清進行g(shù)amma射線輻照,?
gamma 射線輻照的目的是滅活血清中的病毒,,一般情況下,25-40kGy和30-45kGy是常用的輻射劑量,。
五,、如何應(yīng)對血清的批間差?
血清產(chǎn)品通過嚴(yán)格的質(zhì)控盡可能縮小批間差,,但由于血清本身的特點和來源,,無法*避免批間差??蛻艨梢酝ㄟ^做預(yù)測試等方式,,選擇可滿足要求的血清批次。