PCR實(shí)驗(yàn)室耗材質(zhì)檢——PCR管
(1)滲漏密閉性:將n個(gè)PCR管加入半量墨汁,,蓋好蓋子后放入水中,,浸泡30min,沒(méi)有墨汁滲出為合格,。
(2)離心密閉性:將n個(gè)PCR管加入半量純水,,放入離心機(jī),1000 rpm,,30min,,管蓋未崩開(kāi)未漏液為合格。
(3)熱密閉性:將n個(gè)PCR管加入半量純水,,蓋好蓋子稱重后放入PCR儀,,設(shè)置一個(gè)常用的PCR程序,程序運(yùn)行完畢后,,再進(jìn)行稱重,,PCR管未變形,,管蓋未崩開(kāi)未漏液,前后重量未變化為合格,。,。
(4)冷密閉性:將n個(gè)PCR管加入半量純水,放入-20℃冰箱,,24h,,離心管未變形,管蓋未崩開(kāi)未漏液為合格,。
(5)污染物質(zhì)檢:將n個(gè)PCR管加入半量陰性純水,,蓋好蓋子渦旋1 min后靜置5min,作為模板進(jìn)行擴(kuò)增,,qPCR無(wú)擴(kuò)增為合格,。
(6)抑制物質(zhì)檢:將n個(gè)PCR管分別加入弱陽(yáng)性質(zhì)控物,室溫靜置5min,然后進(jìn)行提取;RNA核酸,,DNA核酸,,室溫靜置5min,作為模板進(jìn)行擴(kuò)增,,qPCR擴(kuò)增未被抑制為合格,。
(7)空白熒光通透性:對(duì)于qPCR,需要考察PCR管是否有非特異性熒光信號(hào),將n個(gè)空PCR管,,蓋好蓋子后放入PCR儀,,設(shè)置一個(gè)常用的PCR程序,程序運(yùn)行完畢后,,qPCR無(wú)擴(kuò)增為合格,。
(8)陽(yáng)性熒光通透性:對(duì)于qPCR,還需要考察PCR管是否會(huì)抑制熒光的通透性,將n個(gè)含弱陽(yáng)性樣品和擴(kuò)增試劑的PCR管,,與確認(rèn)無(wú)熒光干擾的PCR管,,蓋好蓋子后放入PCR儀一同擴(kuò)增,設(shè)置一個(gè)常用的PCR程序,,程序運(yùn)行完畢后,,qPCR擴(kuò)增未被抑制為合格。