PCR實(shí)驗(yàn)室中離心管的質(zhì)檢
PCR實(shí)驗(yàn)室中輔料的質(zhì)檢應(yīng)結(jié)合實(shí)際工作中可能用到的場(chǎng)景,,并非越苛刻越好,,需要每個(gè)實(shí)驗(yàn)室結(jié)合自身情況來(lái)設(shè)計(jì)和調(diào)整文中提到的參數(shù),。
離心管:
(1)滲漏密閉性:將n個(gè)離心管加入半量墨汁,,蓋好蓋子后放入水中,,浸泡30min,沒(méi)有墨汁滲出為合格,。
(2)離心密閉性:將n個(gè)離心管加入半量純水,,放入離心機(jī),10000 rpm,,30min,,管蓋未崩開(kāi)未漏液為合格。
(3)熱密閉性:將n個(gè)離心管加入半量純水,,蓋好蓋子稱重后放入金屬浴中,,65℃或90℃(巴氏消毒),30min,,再進(jìn)行稱重,,離心管未變形,管蓋未崩開(kāi)未漏液,,前后重量未變化為合格,。。
(4)冷密閉性:將n個(gè)離心管加入半量純水,,放入-20℃冰箱,,24h,離心管未變形,,管蓋未崩開(kāi)未漏液為合格,。
(5)污染物質(zhì)檢:將n個(gè)離心管分別加入半量陰性純水,蓋好蓋子渦旋1 min后靜置5min,,吸取純水作為模板進(jìn)行擴(kuò)增,,qPCR無(wú)擴(kuò)增為合格。
(6)抑制物質(zhì)檢:將n個(gè)離心管分別加入弱陽(yáng)性質(zhì)控物,室溫靜置5min,,然后進(jìn)行提取;RNA核酸,,DNA核酸,室溫靜置5min,,作為模板進(jìn)行擴(kuò)增,,qPCR擴(kuò)增未被抑制為合格。