DNA pull down實驗技術

1. 實驗原理

DNA pull down是體外研究DNA與蛋白互作的有力工具。該技術將生物素標記的DNA 片段結合在鏈霉親和素磁珠上,，再與細胞核蛋白孵育,，純化出與DNA 片段互作的蛋白，洗滌洗脫得到的蛋白產(chǎn)物,，做Western blot檢測特定蛋白是否與靶DNA 片段結合,；做質譜鑒定即可篩選出與DNA 片段可能互作的蛋白信息(如：轉錄因子、組蛋白等),。

生物素與鏈霉親和素間的作用是目前已知強度最高的非共價作用,；其中活化生物素可以在蛋白質交聯(lián)劑的介導下，與已知的幾乎所有生物大分子偶聯(lián),。因此用生物素標記核酸后,，可以純化出與該核酸結合的各種生物大分子復合物。

2. 實驗流程

1）探針設計及標記：針對靶標區(qū)域設計特異性DNA探針,，探針經(jīng)過脫硫生物素標記,，跟偶聯(lián)在磁珠上的鏈霉親和素結合;

2）Pull down：細胞核提取物與磁珠-DNA探針孵育，靶DNA可以和DNA探針特異性結合,，純化出與靶DNA 片段結合的蛋白復合體,，經(jīng)過洗滌可以將非特異性結合蛋白質去除；最后,，洗脫得到與靶DNA結合的蛋白質復合物,；

3）互作蛋白質鑒定：再經(jīng)過Western Blot或質譜(MS)鑒定蛋白質。

3. 技術服務

1）DNA探針的設計與合成,；

2）細胞培養(yǎng)與核蛋白提?。?/span>

3）Pull down捕獲互作蛋白,；

4）Western blot驗證,；

4）MS鑒定可能的互作蛋白。

4. 交付結果

1）客觀公正的實驗原始數(shù)據(jù)和分析結果,；

2）提供詳細,、完整的實驗報告。

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專注于生命科學領域提供相關試劑產(chǎn)品和服務的生物高科技企業(yè),，坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園,。公司提供種類齊全的細胞系和多種原代細胞、質量穩(wěn)定的細胞培養(yǎng)試劑產(chǎn)品,、成熟高效的技術服務,。本著“守正創(chuàng)新，科學嚴謹"的理念,，我們以高標準塑造行業(yè)品牌,，以全新視野構建現(xiàn)代企業(yè),，勇于探索和創(chuàng)新。公司業(yè)務范圍涉及全國各省市自治區(qū),，與國內(nèi)多家醫(yī)院,、高校、科研院所,、生物科技公司建立了良好的合作關系,，贏得了良好的市場聲譽和廣泛的認可，我們保證將繼續(xù)為廣大科研用戶提供專業(yè),、高效,、優(yōu)質的產(chǎn)品及服務！

細胞系(帶STR鑒定) | 原代細胞 | 細胞培養(yǎng)基 | 血清 | 細胞培養(yǎng)添加因子 | 標記細胞 | 耐藥細胞 | 生化檢測試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等,；ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 16S rRNA測序分析 | Pull down實驗 | RIP 實驗 | ChIP實驗 | Co-IP實驗 | 質譜檢測 | WB檢測 | PCR檢測 | 細胞培養(yǎng)/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測 | micro-CT 檢測  等,。更多信息，歡迎垂詢上海昆盟生物科技有限公司,。