葉綠素含量單位是什么,?葉綠素含量測(cè)定用什么儀器,?
葉綠素含量單位是什么,?葉綠素含量測(cè)定用什么儀器?
葉綠素含量是指示作物葉片營(yíng)養(yǎng)的關(guān)鍵性指標(biāo),,因此在生理生態(tài)研究中,,測(cè)定植物葉綠素含量非常重要,本文主要介紹葉綠素含量單位是什么,?葉綠素含量測(cè)定用什么儀器,?以及葉綠素含量測(cè)定方法詳細(xì)介紹,。
1、葉綠素含量單位是什么,?
在文獻(xiàn)中常見(jiàn)的葉綠素含量單位有兩種:一是以單位葉面積表示的,,二是以單位葉片鮮重表示的。比較起來(lái),還是以單位葉面積表示的較為合理,、適用,,因?yàn)樗皇苋~片含水量變化的干擾,而且也便于與以單位葉面積表示的光合速率聯(lián)系起來(lái)分析兩者關(guān)系,。以單位葉片鮮重表示的葉綠素含量尤其不適用于不同生長(zhǎng)光強(qiáng),、不同供水條件下生長(zhǎng)的植物材料。在以單位葉面積表示的葉綠素含量相同時(shí),,如果以單位葉片鮮重表示,,含水量高的葉片葉綠素含量值會(huì)低于那些含水量低的葉片。在水分脅迫條件下,,這種偏差尤其大,。
在使用儀器測(cè)定葉綠素含量時(shí),葉綠素含量單位一般為SPAD(Soil and plant analyzer develotrnent),,土壤與作物分析開發(fā),,實(shí)際指的是一種測(cè)量濃度的方法,是日本人發(fā)明的,,葉綠素含量SPAD,,就是指用SPAD這種方法測(cè)量的葉綠素濃度。
2,、葉綠素含量測(cè)定用什么儀器,?
葉綠素含量測(cè)定是可以直接使用儀器測(cè)定的,用的儀器主要就是葉綠素含量測(cè)定儀,,它通過(guò)測(cè)定植物的SPAD值含量,,來(lái)表示葉片的綠色程度。
3,、葉綠素含量測(cè)定方法詳細(xì)介紹
3.1,、實(shí)驗(yàn)原理
葉綠素有葉綠素a和葉綠素b兩種類型。葉綠素a,、葉綠素b的內(nèi)酮提取液在紅光區(qū)波長(zhǎng)663nm和645nm處分別具有zui大吸收峰,。在波長(zhǎng)663nm處,葉綠素a,、葉綠素b的80丙酮提取液的吸光系數(shù)分別為82.04和9.27,,在波長(zhǎng)645nm處測(cè)分別為16.75和45.60。根據(jù)加和性原則,可得出葉綠素溶液在波長(zhǎng)663nm和645nm處的吸光度Aw和Ao1s與葉綠素溶液中葉綠素a和葉綠素b的質(zhì)量濃度pa和pb(以mg/L為單位)的關(guān)系,,推導(dǎo)出Amon計(jì)算公式,。
將pa與pb相加即得葉綠素總量P:
此外,葉綠素a,、葉綠素b在波長(zhǎng)652nm處吸收峰相交,兩者有相同的吸光系數(shù),均為34.5,。因此,葉綠素總量pτ還可在652um處測(cè)定:
因此,,根據(jù)葉綠素的丙酮提取液對(duì)可見(jiàn)光譜的吸收特性,,利用分光光度計(jì)在相應(yīng)波長(zhǎng)處測(cè)定提取液的吸光度值,按照前面的公式就可以計(jì)算出提取液中葉綠素的含量,。再根據(jù)果蔬樣品質(zhì)量和提取液的體積,,可以計(jì)算出果蔬組織中葉綠素的含量,。
3.2,、實(shí)驗(yàn)步驟
(1)稱取1.0g果蔬樣品放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3mL80丙酮溶液,研成勻漿,,再加10mL80丙酮溶液繼續(xù)研磨至組織變白,。靜置3~5min提取。
(2)取一張濾紙,,折疊后置于漏斗中,,用80丙酮潤(rùn)濕,沿玻璃棒將提取液倒入漏斗中,過(guò)濾到50mL棕色容量瓶中,,沖洗研缽,、研棒和殘?jiān)鼣?shù)次,zui后連同殘?jiān)?/span>--起倒人漏斗中,,用丙酮溶液沖洗,,直至濾紙和殘?jiān)袩o(wú)綠色為止。
(3)zui后用80丙酮溶液定容至50mL,搖勻,。注意,,各器皿、用具在使用之前須用80丙酮溶液潤(rùn)洗,。
(4)按前面的Amon公式計(jì)算得提取液中葉綠素a和葉綠素b的質(zhì)量濃度,再按下式計(jì)算果蔬組織中葉綠素的含量,,以每克果蔬組織鮮重中所含葉綠素的質(zhì)量表示,即mg/g,。計(jì)算公式:
式中p一由公式計(jì)算得葉綠素的質(zhì)量濃度,,mg/L;V一樣品提取液總體積,,mL,;m—樣品質(zhì)量,g。