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為什么細胞培養(yǎng)基有那么多不同的名字,?常見的1640和DMEM有什么不同?培養(yǎng)基應(yīng)該如何儲存,?
這一期我們講講細胞培養(yǎng)所用到的培養(yǎng)基,。
01 為什么細胞培養(yǎng)基有那么多不同的名字?
培養(yǎng)基有很多不同的名字是因為根據(jù)不同細胞的培養(yǎng)和應(yīng)用場景,,培養(yǎng)基可以分為多種類型,,最常見的是DMEM、RPMI-1640,、MEM等,。
這些培養(yǎng)基有自己的配方特點和適用范圍。例如,,DMEM適用于哺乳動物細胞的培養(yǎng),,而RPMI-1640則適用于淋巴細胞的培養(yǎng)。
此外,,還有一些專門用于特定類型細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,,如神經(jīng)元培養(yǎng)基、肌肉細胞培養(yǎng)基等,。
培養(yǎng)基是直接購買還是自己配制比較合適呢,?我的建議是:常規(guī)的細胞培養(yǎng)直接采購商品化的培養(yǎng)基使用。
商品化的培養(yǎng)基通常以即用型的液體形式或粉劑形式提供,。
這種培養(yǎng)基通常用于常見的細胞培養(yǎng)實驗中,只要按照合適比例加入血清,,就成為了血清培養(yǎng)基,,就可以應(yīng)用于細胞的日常培養(yǎng),、細胞增殖、細胞分化,、細胞凋亡等實驗中,。
剛才提到的DMEM、RPMI-1640,、MEM等培養(yǎng)基經(jīng)常是以這種即用型的液體或粉劑形式提供給實驗操作者的,。
此外,除了這些特定配方的即用型培養(yǎng)基意外,,還有定制型的培養(yǎng)基,,它是指需要根據(jù)特定的配方和比例來自行配制的培養(yǎng)基。
這種培養(yǎng)基通常用于一些特殊的細胞培養(yǎng)實驗中,,如原代細胞培養(yǎng),、干細胞培養(yǎng)等。需要配制的培養(yǎng)基通常包括無血清培養(yǎng)基,、低血清培養(yǎng)基,、添加了特殊因子的培養(yǎng)基等。
這些就需要根據(jù)各自的特殊項目而制定針對性的培養(yǎng)條件了,。
02 常見的1640和DMEM有什么不同,?
下面我們以實驗室最常見的DMEM和RPMI-1640為例,來介紹它們之間的不同之處,。
DMEM是一種最經(jīng)常應(yīng)用的細胞培養(yǎng)基之一,,它是由Eagle于1959年開發(fā)出來的,后由Dulbecco進行了改良,。
DMEM主要適用于肝臟,、腎臟、肺,、心臟等多種類型的哺乳動物細胞系的培養(yǎng),。DMEM中含有較高濃度的葡萄糖(4500mg/L)、氨基酸,、維生素和微量元素等營養(yǎng)物質(zhì),。
此外,DMEM還添加了丙酮酸和乳酸等緩沖劑,,能夠保持細胞在較寬的pH范圍內(nèi)正常生長,。
RPMI-1640(Roswell Park Memorial Institute medium 1640)是一種由Roswell Park紀念研究所開發(fā)的細胞培養(yǎng)基,適用于淋巴細胞,、骨髓細胞,、白血病細胞等多種類型的哺乳動物細胞系的培養(yǎng)。
RPMI-1640中含有較低濃度的葡萄糖(2000mg/L),、氨基酸,、維生素和微量元素等營養(yǎng)物質(zhì),。
此外,RPMI-1640還添加了緩沖劑HEPES和碳酸氫鹽,,能夠保持細胞在較窄的pH范圍內(nèi)正常生長,。
DMEM和RPMI-1640在營養(yǎng)成分和緩沖劑的配比上有所不同,上述提到它們各自適合培養(yǎng)的細胞種類是經(jīng)過大量實驗驗證得到的結(jié)果,,建議同學(xué)們遵照執(zhí)行即可,。
但這也并不代表用錯了培養(yǎng)基細胞就一定會死掉,因為DMEM和1640只是在少數(shù)成分上做了針對優(yōu)化,,對于大部分細胞株,,即使用錯,也只是不那么合適而已,。
03 購買回來的培養(yǎng)基應(yīng)該如何儲存,?
培養(yǎng)基是一種含有大量營養(yǎng)物質(zhì)的復(fù)雜溶液,其成分非常容易受到環(huán)境的影響而發(fā)生變化,。因此,,在儲存和使用培養(yǎng)基時需要注意以下幾點:
溫度:有條件的情況下,培養(yǎng)基應(yīng)該儲存在4°C冰箱中,,避免暴露在高溫環(huán)境中,。此外,在使用前需要將培養(yǎng)基恢復(fù)到室溫,。
光照:培養(yǎng)基應(yīng)該避免暴露在陽光下或強烈的熒光燈下,,以免造成成分變化。
消毒:在使用前需要對培養(yǎng)基進行消毒處理,,以避免細菌和病毒污染,。
儲存時間:一般來說,開封后的培養(yǎng)基應(yīng)該在一個月內(nèi)使用完畢,,以避免成分變化造成影響,。
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