RNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的影響因素有很多，而細(xì)胞狀態(tài)往往是同學(xué)們最容易忽略的一點(diǎn)。如果細(xì)胞狀態(tài)差,，那么轉(zhuǎn)染時(shí)就會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞死亡、轉(zhuǎn)染效率低下等結(jié)果,。那么關(guān)于細(xì)胞狀態(tài),，我們應(yīng)該注意些什么呢？

一,、使用凍存復(fù)蘇后,，已傳了兩三代的細(xì)胞
剛剛復(fù)蘇的細(xì)胞十分脆弱，稍有不慎就會(huì)死亡,，因此一切接觸細(xì)胞的動(dòng)作都要盡可能地輕柔,。一般而言，細(xì)胞在凍存復(fù)蘇后的一兩代之內(nèi)或直到它們?nèi)繌?fù)蘇之前都很難轉(zhuǎn)染,。建議在傳代2-3代后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn),，此時(shí)的細(xì)胞從解凍過程中恢復(fù)過來，并恢復(fù)正常的生長(zhǎng)速度,，狀態(tài)較為穩(wěn)定,。

二、細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛,，形態(tài)正常
1,、通常情況下，細(xì)胞在快速增殖時(shí)轉(zhuǎn)染效率較高,，但在停滯或死亡時(shí)轉(zhuǎn)染效率明顯下降,，因而進(jìn)行小核酸轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)時(shí)，細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,，同時(shí)細(xì)胞比活性應(yīng)保持在90%以上,，這樣才能獲得較好的轉(zhuǎn)染效率。
2,、其次,，細(xì)胞具有多種多樣的形態(tài),，我們?cè)谑褂眉?xì)胞時(shí)，一定要牢記它本來的形態(tài),，如球形,、桿狀、星形,、多角形,、梭形、圓柱形等,，這樣才能及時(shí)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞是否已經(jīng)變異,，或是培養(yǎng)環(huán)境條件（密度,、PH,、培養(yǎng)基、微生物污染等）是否影響細(xì)胞正常生長(zhǎng),。

三,、注意細(xì)胞污染問題
1、細(xì)胞污染一般是由于操作不規(guī)范或無菌措施不到位等引起的,，如真菌,、細(xì)菌、支原體,、黑膠蟲,、病毒、細(xì)胞交叉污染等,，繼而導(dǎo)致不同程度的細(xì)胞退化,、活性下降、生長(zhǎng)變緩,、甚至細(xì)胞死亡,。
2、如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞污染,，須立即停止實(shí)驗(yàn)并及時(shí)處理污染源,，以免造成更大的影響。切勿急功近利,，使用受污染的細(xì)胞,，否則會(huì)造成實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的錯(cuò)誤、影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,。

以上就是針對(duì)于siRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)有關(guān)于細(xì)胞狀態(tài)需要注意的方面,。要知道無論是什么科研，好的實(shí)驗(yàn)材料才能鑄就好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，希望大家可以重視起來,，切莫因小失大,！

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