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深圳市安培生物科技有限公司
中級會(huì)員 | 第5年

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時(shí)間:2022/12/13閱讀:1031
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原理

細(xì)胞懸液用碘化丙啶和二乙酰熒光素的混合液染色,,用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測,。

材料與儀器


步驟


材料

無菌

單細(xì)胞懸液
雙醋酸熒光素,,10ug/ml,,溶于 HBSS
碘化丙啶,500ug/ml

非滅菌

熒光顯微鏡
濾光片
熒光素:激發(fā) 450/590 nm ,發(fā)射 LP 515 nm
碘化丙啶:激發(fā) 488nm ,,發(fā)射 615 nm

操作步驟

1. 細(xì)胞懸液的制備與染料排斥法相同(見方案 22.1),,但是生長液中不含酚紅。
2. 以 1 : 10 的比例加入熒光素染料混合液,,二乙酰熒光素的終濃度為 l ug/ml,,碘化丙啶的終濃度為 50ug/ml。 :
3. 將細(xì)胞置于 37°C , 溫育 10 min,。
4. 將一滴細(xì)胞滴在載玻片上,,蓋上蓋玻片,用熒光顯微鏡觀察,。


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