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中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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為什么細(xì)胞會(huì)抱團(tuán)?因?yàn)樘鞖饫淞耍?/h1>
時(shí)間:2021/12/9閱讀:4026
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是否總是遇到細(xì)胞抱團(tuán)的現(xiàn)象,?是否總是因?yàn)楦悴磺宄?xì)胞抱團(tuán)原因而困惑,?是否總是因?yàn)殡y以將抱團(tuán)細(xì)胞拯救回來而抓狂?童鞋們,,我來拯救你們的細(xì)胞了,,今天給大家從四個(gè)層面剖析細(xì)胞抱團(tuán)的真實(shí)原因,快來圍觀吧,!


一,、細(xì)胞本身生長(zhǎng)特性有抱團(tuán)傾向

有些細(xì)胞本身有抱團(tuán)生長(zhǎng)的特性,給大家看五種喜歡抱團(tuán)的細(xì)胞類型:


細(xì)胞類型①:NCI-H716 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)


圖片
細(xì)胞喜歡在懸浮液中呈葡萄狀聚集,,抱團(tuán)細(xì)胞粒粒飽滿


細(xì)胞類型②:Caco-2人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

形態(tài):上皮樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞喜歡貼壁成片分布,,呈融合狀,細(xì)胞個(gè)頭大小不勻


細(xì)胞類型③:CaLu-3 人肺癌細(xì)胞

形態(tài):上皮樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞也是喜歡聚集分布,,呈片狀,,片狀之間有空白



細(xì)胞類型④:SH-SY5Y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

形態(tài):上皮樣

生長(zhǎng)特性:貼壁和懸浮生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞貼壁居多,有輕微的抱團(tuán)傾向



細(xì)胞類型⑤:BT-474人乳腺癌細(xì)胞

形態(tài):上皮樣

生長(zhǎng)特性:貼壁,、片狀生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞也是喜歡片狀生長(zhǎng)



除了有喜歡抱團(tuán)的細(xì)胞類型,,也會(huì)有喜歡分散生長(zhǎng)的細(xì)胞類型,來給大家展示二種細(xì)胞類型:

細(xì)胞類型①:MSC(人源脂肪來源)

形態(tài):成纖維樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞成纖維樣,,均勻分布,,平鋪皿底,不留空隙



細(xì)胞類型②:HEF小兒包皮成纖維細(xì)胞(人源脂肪來源)

形態(tài):成纖維樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)


圖片
此細(xì)胞也是喜歡分散生長(zhǎng),,均勻分布



大多數(shù)上皮樣或神經(jīng)母細(xì)胞瘤樣的細(xì)胞更喜歡抱團(tuán)生長(zhǎng),,而大多數(shù)成纖維樣細(xì)胞更喜歡分散、均勻生長(zhǎng),。


又有一個(gè)問題來了,,那就是我們?nèi)绾螀^(qū)分細(xì)胞抱團(tuán)正不正常。

這里開始劃重點(diǎn)了,,大家看好了:

  1. 如果細(xì)胞本身是分散生長(zhǎng),,結(jié)果抱團(tuán)嚴(yán)重,說明細(xì)胞“生病"了,,我們要給細(xì)胞“診治",。

  2. 如果本身生長(zhǎng)特性就有抱團(tuán)的細(xì)胞,如何判斷它的抱團(tuán)正不正常呢?


這里小編告訴您,,細(xì)胞哪怕是抱團(tuán)了,,也是“粒粒飽滿,棱角分明"的,,回頭看看上面抱團(tuán)的細(xì)胞,,是不是細(xì)胞之間有明確的“分界線",這說明它們抱在一起很健康,;而異常的細(xì)胞抱團(tuán),,你是觀察不到細(xì)胞之間的“界限"的,細(xì)胞形態(tài)也不規(guī)則,,邊緣模糊,,遠(yuǎn)遠(yuǎn)看去,抱團(tuán)的細(xì)胞像“一團(tuán)漿糊",。



二,、細(xì)胞老化更容易抱團(tuán) 


細(xì)胞類型:MSC(人源臍帶來源第6代)

形態(tài):成纖維樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

圖片
如圖所示:

人臍帶來源第6代的間充質(zhì)干細(xì)胞,白色箭頭指示的是發(fā)生細(xì)胞老化的MSC細(xì)胞,,β-半乳糖苷酶染色陽性,,染上藍(lán)色。由圖片可以看出老化細(xì)胞體積增大,、細(xì)胞扁平,。白圈圈起來的是聚團(tuán)細(xì)胞,老化細(xì)胞容易聚團(tuán)生長(zhǎng),,狀態(tài)變差,。


三、血清批間差可能導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán) 

那么問題來了,,血清為何有批間差,?

因?yàn)檠鍋碓从趧?dòng)物,其組成成分有1000種左右,,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏哪挲g,、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件而異。每個(gè)批號(hào)的組分百分比含量都是不固定的,,所以批間差異是存在的,。

圖片

H9c2 低密度正常形態(tài)

舊批次血清


圖片

H9c2 低密度抱團(tuán)形態(tài)

新批次血清


圖片

H9c2高密度異常形態(tài)

舊批次血清


圖片

H9c2高密度異常形態(tài)

新批次血清


血清批間差可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán)。

如圖所示,,大鼠心肌細(xì)胞在更換了新批次的血清之后,,隨著傳代次數(shù)的增加,抱團(tuán)明顯,。正常低密度下,,細(xì)胞舒展開來,,均勻分散,但異常的的細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)聚集生長(zhǎng)狀態(tài),,高密度下正常細(xì)胞像鋪路石一樣均勻鋪滿,不留空隙,,但高密度下異常的細(xì)胞,,形態(tài)模糊,難以辨認(rèn),,像四川九寨溝一樣的溝壑重生,。


四、胰酶消化不當(dāng)容易導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán) 

圖片

HEK293細(xì)胞


導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán)的第一種情況是胰酶消化操作不當(dāng),。

如果您經(jīng)常遇到傳代的細(xì)胞貼壁后老是貼壁不勻,,成片分布,抱團(tuán)生長(zhǎng),,來看看你有沒有注意這幾個(gè)細(xì)節(jié)噢,。

1、如圖所示,,HEK 293因消化過度或吹打過猛導(dǎo)致細(xì)胞受傷嚴(yán)重,,破損的細(xì)胞碎片容易粘連抱團(tuán);

2,、消化時(shí)細(xì)胞融合率太高,,成片脫落,將不容易被吹散,,容易抱團(tuán),,我們建議細(xì)胞融合率達(dá)到80%傳代為佳;

3,、吹打力度不足,,難以將成片脫落的細(xì)胞吹散,容易抱團(tuán),。



以上就是本期的內(nèi)容,,更多資訊,歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊,。


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安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究,、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn),、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),,包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品,;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL,、對(duì)細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品,。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),,努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè),。


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