1、如何正確選擇培養(yǎng)基種類,？

引用幾款比較經(jīng)典的培養(yǎng)基舉例：

2,、如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基？

培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒(méi)有固定的培養(yǎng)條件,。在 MEM 中培養(yǎng)的細(xì)胞,，很可能在 DMEM 或 M199 中同樣很容易生長(zhǎng)?？傊?，首先選 MEM 做粘附細(xì)胞培養(yǎng)，RPMI-1640 做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開(kāi)始,。

3,、什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？

酚紅在培養(yǎng)基中被用來(lái)作為 PH 值的指示劑：中性時(shí)為紅色,，酸性時(shí)為黃色,，堿性時(shí)為紫色。研究表明,，酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素）,。為避免固醇類反應(yīng),，培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),，用不加酚紅的培養(yǎng)基,。由于酚紅干擾檢測(cè)，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基,。

4、細(xì)胞培養(yǎng)基的配制和儲(chǔ)存應(yīng)該注意什么,？

細(xì)胞培養(yǎng)基配好后,，要先抽取少許放入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置24~48h，已檢測(cè)培養(yǎng)液是否有污染,，然后方可用于實(shí)驗(yàn),。配置培養(yǎng)基所需的血清要合格并且保持穩(wěn)定。一個(gè)批號(hào)試用效果良好后,，就可一次購(gòu)入較多同一批號(hào)的血清,，這樣實(shí)驗(yàn)條件穩(wěn)定，配液時(shí)調(diào)整pH值較容易,。每次配液量以使用兩周左右的量為宜,，一次配液不要太多，一是短期內(nèi)用不完造成營(yíng)養(yǎng)成分損失需要補(bǔ)充,，二是量大易造成污染,。

5、為何培養(yǎng)基保存于 4 ℃ 冰箱中,，顏色會(huì)偏紫色,？

培養(yǎng)基保存于 4 ℃ 冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)的 CO2 會(huì)逐漸溢出,，造成培養(yǎng)基越來(lái)越偏堿性,，而培養(yǎng)基中的酸堿指示劑 （通常為 phenol red） 的顏色也會(huì)隨堿性增加而更偏紫色。培養(yǎng)基偏堿的結(jié)果,， 將造成細(xì)胞生長(zhǎng)停滯或死亡,。若培養(yǎng)基偏堿時(shí)，可以通入無(wú)菌過(guò)濾 CO2,，以調(diào)整 pH 值,。

6、什么情況下用到無(wú)血清培養(yǎng)基,？

對(duì)于應(yīng)用培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行分離制備細(xì)胞生長(zhǎng)因子,、單克隆抗體等應(yīng)該選擇無(wú)血清培養(yǎng)基。

7、如何選擇正確的血清種類,？

8,、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同的血清種類？

不能,。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清,，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。

9,、血清滅活是否必須,？

一般情況下不建議。熱滅活是以 56℃,，30 分鐘來(lái)處理已解凍的血清,，因?yàn)榇思訜岵襟E，可以使補(bǔ)體去活化,，而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有：溶細(xì)胞活性,，平滑肌的收縮，肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,，增強(qiáng)吞噬作用,，淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活,。

實(shí)驗(yàn)顯示,，經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清，對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過(guò)的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),，或*沒(méi)有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,，而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,， 這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察，像是 "小黑點(diǎn)",，常常會(huì)讓研究者 誤以為是血清遭受污染,，而把血清放在 37C 環(huán)境中，又會(huì)使此沉淀 物更增多,，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。因此除了做免疫學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)和培養(yǎng)一些特定細(xì)胞，如平滑肌細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞等,，不需要做熱滅活處理,。

10、培養(yǎng)基中是否添加抗生素,？

除特殊篩選系統(tǒng)中外,，一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下，培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素,。

11,、何時(shí)更換培養(yǎng)基？

視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。