本期跟大家分享復蘇凍存細胞時,，常見的問題處理方法,，希望幫助大家平時在復蘇凍存細胞時減少出錯,。

1,、收到的冷凍管瓶身破裂,，瓶蓋有裂紋,，或瓶蓋脫落的原因？

冷凍管瓶蓋裂紋,，或瓶身破裂,，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損,，建議使用止血鉗小心夾取,。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，是因熱脹冷縮的物理現(xiàn)象,，冷凍管有可能因此而造成細胞污染,，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊,。

2,、冷凍管應如何解凍？

將冷凍管由液氮桶中取出解凍時,，必須注意安全,，可佩戴防護眼鏡和手套預防冷凍管的爆裂。取出冷凍管后,，須立即放入 37 ℃ 水浴環(huán)境中快速解凍,，輕搖冷凍管使其在 1 分鐘內全部融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內形成胞內再結晶對細胞造成損害,。并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,，否則易發(fā)生污染情形。

3,、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,，是否應馬上去除 DMSO？

現(xiàn)在大多數(shù)實驗室會在解凍細胞后加培養(yǎng)液將DMSO除去,，但也有研究者認為除少數(shù)特別注明對 DMSO 敏感的細胞外,，絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞），在解凍之后,，可直接放入含有 10~15 ml 新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)角瓶中,，待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除 DMSO 即可,，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題。

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