本期跟大家分享復蘇凍存細胞時,，常見的問題處理方法，希望幫助大家平時在復蘇凍存細胞時減少出錯,。

1,、收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋,，或瓶蓋脫落的原因,？

冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂,，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取,。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,，是因熱脹冷縮的物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染,，故冷凍管于放入和取出液氮桶時,，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。

2,、冷凍管應如何解凍,？

將冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全,，可佩戴防護眼鏡和手套預防冷凍管的爆裂,。取出冷凍管后，須立即放入 37 ℃ 水浴環(huán)境中快速解凍,，輕搖冷凍管使其在 1 分鐘內(nèi)全部融化,，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損害,。并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形,。

3,、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時，是否應馬上去除 DMSO,？

現(xiàn)在大多數(shù)實驗室會在解凍細胞后加培養(yǎng)液將DMSO除去,，但也有研究者認為除少數(shù)特別注明對 DMSO 敏感的細胞外，絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞）,，在解凍之后,，可直接放入含有 10~15 ml 新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)角瓶中，待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除 DMSO 即可,，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附的問題,。

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