材料與儀器
SD大鼠
PBS FBS DMEM
手術剪 手術鉗 眼科剪刀 眼科鑷子 大頭針 手術刀 培養(yǎng)皿
步驟
一、實驗步驟
1. SD 大鼠(150-200 g)，斷頭,，浸入75%的酒精中15 min。
2. 置入超凈臺中,，將大鼠固定于殺鼠板上,，在無菌條件下打開腹腔，分離出胸主動脈,、腹主動脈,， 摘出。
3. PBS 清洗3 遍,，剝去外膜,，用手術刀片刮去內膜，留下中膜并將其移入1 mL 的培基中,、剪成1x1 mm2 大小組織塊,。
4. 再將PBS清洗組織塊，移入25 mL 的培養(yǎng)瓶中,，用尖嘴彎管均勻貼好組織塊,，放入37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)6 小時后,，待組織塊貼壁后,，再加入2.5 mL 培養(yǎng)液后放回培養(yǎng)箱中。
5. 隨后每3 天予以全量換液,。
二,、結果
3-5 天后可見組織塊周圍有細胞爬出，大約2 周后80－90%融合,。
