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當(dāng)前位置：深圳市安培生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>qPCR實驗結(jié)果分析基本步驟（一）
實時熒光定量PCR實驗會產(chǎn)生大量實驗數(shù)據(jù),，一般可以用PCR儀自帶的軟件進(jìn)行收集,、分析,。但即使有了方便可靠的軟件,，我們也需要對原始數(shù)據(jù)進(jìn)行檢查,、再分析,，評估數(shù)據(jù)的質(zhì)量和可靠性。
這需要三個基本的步驟,。
第一步,，查看擴(kuò)增曲線，有必要時調(diào)整基線和閾值,。
Ct值由基線和閾值計算得來,，所以他們的值對結(jié)果影響很大。軟件會給出1個默認(rèn)的基線和閾值,，但不一定是最合適的,，需要我們進(jìn)行手動調(diào)整。
首*行基線的調(diào)整,。
一般范圍是循環(huán)數(shù)3～15,，使得靶基因的擴(kuò)增信號大于背景噪聲。出現(xiàn)不正常的擴(kuò)增曲線,，通常是因為設(shè)置了不正常的基線,，需要對單個孔進(jìn)行設(shè)置。
比較好的做法是,，基線的最小值（起始循環(huán)數(shù)）設(shè)置在背景噪聲的尾巴后,，最大值（結(jié)束循環(huán)數(shù)）設(shè)置為擴(kuò)增起始點。
循環(huán)范圍在5個循環(huán)就可以,，具體跟擴(kuò)增曲線的對數(shù)圖來設(shè)定,。
擴(kuò)增曲線的對數(shù)圖是什么？下期告訴你
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