細(xì)胞為啥總是一言不合就抱團(tuán)生長(zhǎng)？,！

是細(xì)胞污染了還是正?，F(xiàn)象？

是消化不好了還是鋪板有問題,？

抱團(tuán)細(xì)胞越來越多,，怎么樣才能讓細(xì)胞分開生長(zhǎng)？

請(qǐng)認(rèn)真閱讀以下干貨,，看看能否幫您答疑解惑,！

細(xì)胞抱團(tuán)一定代表細(xì)胞狀態(tài)不好嗎？

▲RAW264.7細(xì)胞-正常狀態(tài)

▲RAW264.7細(xì)胞-異常狀態(tài)

▲H9c2細(xì)胞-正常狀態(tài)

▲H9c2細(xì)胞-異常狀態(tài)

3,、細(xì)胞抱團(tuán)是因?yàn)榧?xì)胞污染了嗎,？一般細(xì)胞培養(yǎng)液清亮，就不是污染,。如果是污染了的話,，可以通過觀察培養(yǎng)液顏色，若污染,，則很渾濁,。

細(xì)胞為啥總是喜歡抱團(tuán)？

• 細(xì)胞死亡釋放出DNA,，纏繞其他細(xì)胞,，形成黏性的細(xì)胞團(tuán)（消化的過程可能過于粗暴，吹打太用力,，消化太久,，消化液太強(qiáng)或有毒性等）,。

• 細(xì)胞離心速度過大或時(shí)間太長(zhǎng)。

• 消化不*的時(shí)候,，細(xì)胞和細(xì)胞之間的連接沒有分開,；消化過度的時(shí)候，圓形的細(xì)胞容易聚堆,，再分開很困難,！

• 狀態(tài)不好、老化的細(xì)胞,，也可能會(huì)出現(xiàn)抱團(tuán)生長(zhǎng)的情況（比如換液不及時(shí),、長(zhǎng)的太滿才傳代、污染等造成的細(xì)胞狀態(tài)差）,。

• 傳代時(shí)沒有吹打均勻,，細(xì)胞團(tuán)多，培養(yǎng)時(shí)就會(huì)是一團(tuán)一團(tuán)的,。

• 傳代后細(xì)胞鋪板不均勻,。

• 有可能是雜細(xì)胞，或者死細(xì)胞,。

• 細(xì)胞未消化開,。

• 非震蕩培養(yǎng)或細(xì)胞量過多的話就會(huì)成團(tuán)。

如何避免細(xì)胞抱團(tuán),？

• 用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞,。

• 對(duì)于貼壁非常牢固的細(xì)胞（如MDCK），為了細(xì)胞更好的狀態(tài),，更漂亮的樣子,，建議分多批多次消化，這樣才能最大限度地降低胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷,，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠*,。

• 細(xì)胞生長(zhǎng)密度不要太高，70%－80％就好（細(xì)胞剛剛基本成單層細(xì)胞,，沒有出現(xiàn)堆疊生長(zhǎng)）,，這樣細(xì)胞抱團(tuán)的幾率就大大減少了。如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)成集落,，可先將細(xì)胞低密度傳代,，第二天再消化傳代，這樣連續(xù)傳三次,，細(xì)胞抱團(tuán)就會(huì)越來越小,，這樣幾代過后，再按照常規(guī)消化方法和時(shí)間能將細(xì)胞逐漸傳成單個(gè)的,。

• 消化過程中最好不要使勁搖動(dòng)培養(yǎng)瓶,，這樣細(xì)胞特別容易成屑樣脫落,。細(xì)胞一旦脫落入懸液里就很難再將他吹打成單個(gè)（因?yàn)榧?xì)胞沒有受力點(diǎn)了，所以細(xì)胞很難分散開）,。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,，嚴(yán)格控制好消化程度。

• 消化過程需要使用槍頭輕輕吹打,，切忌使勁拍培養(yǎng)瓶的側(cè)壁,。拍瓶子想要將細(xì)胞拍散的力度對(duì)于細(xì)胞來說相當(dāng)于大地震，細(xì)胞本身是無法承受如此振蕩的,。

細(xì)胞抱團(tuán)了,，要如何處理？