細(xì)胞為啥總是一言不合就抱團(tuán)生長(zhǎng),？！

是細(xì)胞污染了還是正?，F(xiàn)象,？

是消化不好了還是鋪板有問(wèn)題,？

抱團(tuán)細(xì)胞越來(lái)越多，怎么樣才能讓細(xì)胞分開(kāi)生長(zhǎng),？

請(qǐng)認(rèn)真閱讀以下干貨,，看看能否幫您答疑解惑！

細(xì)胞抱團(tuán)一定代表細(xì)胞狀態(tài)不好嗎,？

▲RAW264.7細(xì)胞-正常狀態(tài)

▲RAW264.7細(xì)胞-異常狀態(tài)

▲H9c2細(xì)胞-正常狀態(tài)

▲H9c2細(xì)胞-異常狀態(tài)

3,、細(xì)胞抱團(tuán)是因?yàn)榧?xì)胞污染了嗎？一般細(xì)胞培養(yǎng)液清亮,，就不是污染,。如果是污染了的話(huà)，可以通過(guò)觀察培養(yǎng)液顏色,，若污染,，則很渾濁,。

細(xì)胞為啥總是喜歡抱團(tuán)？

• 細(xì)胞死亡釋放出DNA,，纏繞其他細(xì)胞,，形成黏性的細(xì)胞團(tuán)（消化的過(guò)程可能過(guò)于粗暴，吹打太用力,，消化太久,，消化液太強(qiáng)或有毒性等）。

• 細(xì)胞離心速度過(guò)大或時(shí)間太長(zhǎng),。

• 消化不*的時(shí)候,，細(xì)胞和細(xì)胞之間的連接沒(méi)有分開(kāi)；消化過(guò)度的時(shí)候,，圓形的細(xì)胞容易聚堆,，再分開(kāi)很困難！

• 狀態(tài)不好,、老化的細(xì)胞,，也可能會(huì)出現(xiàn)抱團(tuán)生長(zhǎng)的情況（比如換液不及時(shí)、長(zhǎng)的太滿(mǎn)才傳代,、污染等造成的細(xì)胞狀態(tài)差）。

• 傳代時(shí)沒(méi)有吹打均勻,，細(xì)胞團(tuán)多,，培養(yǎng)時(shí)就會(huì)是一團(tuán)一團(tuán)的。

• 傳代后細(xì)胞鋪板不均勻,。

• 有可能是雜細(xì)胞,，或者死細(xì)胞。

• 細(xì)胞未消化開(kāi),。

• 非震蕩培養(yǎng)或細(xì)胞量過(guò)多的話(huà)就會(huì)成團(tuán),。

如何避免細(xì)胞抱團(tuán)？

• 用無(wú)鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞,。

• 對(duì)于貼壁非常牢固的細(xì)胞（如MDCK）,，為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子,，建議分多批多次消化,，這樣才能最大限度地降低胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠*,。

• 細(xì)胞生長(zhǎng)密度不要太高,，70%－80％就好（細(xì)胞剛剛基本成單層細(xì)胞，沒(méi)有出現(xiàn)堆疊生長(zhǎng)）,，這樣細(xì)胞抱團(tuán)的幾率就大大減少了,。如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)成集落,，可先將細(xì)胞低密度傳代，第二天再消化傳代,，這樣連續(xù)傳三次,，細(xì)胞抱團(tuán)就會(huì)越來(lái)越小，這樣幾代過(guò)后,，再按照常規(guī)消化方法和時(shí)間能將細(xì)胞逐漸傳成單個(gè)的,。

• 消化過(guò)程中最好不要使勁搖動(dòng)培養(yǎng)瓶，這樣細(xì)胞特別容易成屑樣脫落,。細(xì)胞一旦脫落入懸液里就很難再將他吹打成單個(gè)（因?yàn)榧?xì)胞沒(méi)有受力點(diǎn)了,，所以細(xì)胞很難分散開(kāi)）。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開(kāi),，嚴(yán)格控制好消化程度,。

• 消化過(guò)程需要使用槍頭輕輕吹打，切忌使勁拍培養(yǎng)瓶的側(cè)壁,。拍瓶子想要將細(xì)胞拍散的力度對(duì)于細(xì)胞來(lái)說(shuō)相當(dāng)于大地震,，細(xì)胞本身是無(wú)法承受如此振蕩的。

細(xì)胞抱團(tuán)了,，要如何處理,？