近年來,，納米材料已經(jīng)在生物醫(yī)藥領(lǐng)域具有了廣泛的應(yīng)用。外泌體,、合成納米顆粒等已被廣泛應(yīng)用于疾病診斷,，藥物遞送等方面。納米材料的尺寸和濃度對(duì)于診斷和治療效果具有十分重要的意義,，納米顆粒跟蹤分析（NTA）技術(shù)是一種常用的表征納米材料大小和濃度的方法，可以對(duì)納米材料進(jìn)行快速,、精確的粒徑和濃度測量,。
前人曾多次報(bào)道，與 DLS 相比,，NTA 在確定單峰和雙峰納米顆粒的尺寸時(shí)具有更好的分辨率,，但NTA 無法高分辨率解析三個(gè)或以上的多峰混合的粒子群。用于數(shù)據(jù)處理的算法也極大地影響 NTA 和 DLS 分析的粒徑結(jié)果輸出,，且二者對(duì)樣本溶液的粘度十分敏感,。同時(shí)， NTA的濃度結(jié)果被高估已在多項(xiàng)研究中被報(bào)道,，這種高估可能與測量參數(shù)的主觀選擇以及樣品顆粒尺寸和光學(xué)性質(zhì)的不均勻性有關(guān),。NTA的尺寸檢測限（LOD）與準(zhǔn)確的濃度測定有關(guān),。然而，目前還沒有標(biāo)準(zhǔn)的操作程序來保證測量的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性,。在NTA使用過程中,，包括樣品濃度、相機(jī)設(shè)定參數(shù),、樣品流速等人為設(shè)置都會(huì)對(duì)測量結(jié)果造成巨大影響,。同時(shí)，樣品的分散性,、復(fù)雜度也會(huì)在很大程度上影響NTA的測量結(jié)果,。因此，考慮到影響尺寸和濃度準(zhǔn)確測量的因素以及設(shè)置測量參數(shù)時(shí)可能存在的主觀偏差,，需要優(yōu)化參數(shù)的研究以建立標(biāo)準(zhǔn)化方案,，從而實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確濃度測定，以便增加數(shù)據(jù)的可比性并支持基礎(chǔ)研究和質(zhì)量控制監(jiān)管部門的批準(zhǔn),。
隨后，作者利用建立的NTA標(biāo)準(zhǔn)化操作,，通過正交實(shí)驗(yàn),，橫向?qū)Ρ攘薔TA與透射電子顯微鏡 (TEM)，動(dòng)態(tài)光散射 (DLS),，和基于電阻感應(yīng)脈沖 (RPS) 原理的納米庫爾特粒度儀NanoCoulter對(duì)真實(shí)且復(fù)雜樣本的分析能力,。
圖1. NTA、DLS和RPS對(duì)多峰（多模態(tài)）樣本的表征
文中也總結(jié)了NTA, DLS, TEM和RPS這四種顆粒分析方法的特點(diǎn)與缺陷。作者認(rèn)為NTA雖然具有較好的測量分辨率和準(zhǔn)確度,，但是無法對(duì)生物學(xué)樣本進(jìn)行更精確的分析,，無法確定外泌體樣本的來源，同時(shí)對(duì)于多峰樣本僅能對(duì)三峰樣本實(shí)現(xiàn)區(qū)分并測量,；對(duì)于DLS方法,，作者認(rèn)為該方法偏差很大，得到的測量值與真實(shí)值具有很大差異,，同時(shí)該方法無法有效測量顆粒的濃度,；作者認(rèn)為TEM方法可以直接提供顆粒的可視化觀察的數(shù)據(jù)，但是該方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力,，投入很高,；對(duì)于RPS方法，作者認(rèn)為該方法可以測量顆粒的真實(shí)粒徑,，同時(shí)對(duì)于四峰樣本也可以給出十分精確的測量結(jié)果,，展現(xiàn)出極其優(yōu)異的區(qū)分能力。
RPS可以通過單顆粒分析對(duì)通過檢測器（納米孔）的每一個(gè)顆粒進(jìn)行計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì),，計(jì)算單位時(shí)間/體積下的樣品濃度,，與NTA等光學(xué)計(jì)數(shù)的方式相比，不存在顆粒散射信號(hào)相互遮擋的情況,，因此測量的結(jié)果準(zhǔn)確性更高,，非常適合作為光學(xué)原理檢測方法驗(yàn)證和較準(zhǔn)的參考。作者也在最后建議進(jìn)行復(fù)雜樣品的粒度分析時(shí),，應(yīng)選取原理不同的多種測試方法進(jìn)行正交評(píng)估,，以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性?；陔妼W(xué)原理的RPS技術(shù)可以很好地與基于光學(xué)方法的NTA或DLS互補(bǔ)，使顆粒粒徑分布的表征更為準(zhǔn)確,。
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