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病毒質(zhì)量控制的新幫手

閱讀:442      發(fā)布時(shí)間:2023-6-8
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       病毒作為形態(tài)最微小,結(jié)構(gòu)最簡(jiǎn)單的微生物,,和我們的日常生活緊密相連?,F(xiàn)在隨著科學(xué)的發(fā)展進(jìn)步,病毒也早已不只是致病源的代名詞,,而是被開發(fā)出了對(duì)人類有益的用處,。比如,噬菌體可以作為防治某些疾病的特效藥,;在細(xì)胞過程中某些病毒可以作為細(xì)胞融合的助溶劑,;在基因工程中病毒可以作為目的基因的載體,使之被拼接在目標(biāo)細(xì)胞的染色體上等等,。

在病毒發(fā)揮這些功能的過程中,,對(duì)病毒的質(zhì)量控制是非常重要的,這就需要對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確高效的表征,。目前常用的病毒表征方式主要有ELISA,、RT-qPCR、TCID50等,主要檢測(cè)的是病毒的滴度,,也就是病毒活力,,以此確定病毒的感染能力。但這些方法有一個(gè)共同的缺點(diǎn),,那就是耗時(shí)較長(zhǎng),,其中用時(shí)最短的RT-qPCR也要花費(fèi)1-2小時(shí)。并且這些檢測(cè)方式無法得到在病毒的質(zhì)量控制中十分重要的兩項(xiàng)參數(shù)——病毒的粒徑和濃度,。在實(shí)際應(yīng)用中,,病毒的粒徑和濃度能為研究人員提供許多信息,比如粒徑較小的病毒可能有團(tuán)聚的風(fēng)險(xiǎn),,濃度較高的病毒則往往代表了較高的感染效率等,。

在介紹了這么多相關(guān)的理論知識(shí)之后,就讓我們來看一下納米庫爾特粒度儀在病毒質(zhì)量控制中的表現(xiàn)吧,。俗話說,,百聞不如一見,相信這些實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)能讓讀者們有一個(gè)更直觀的印象,。

這是使用納米庫爾特粒度儀分別對(duì)純化前后的病毒收獲液進(jìn)行測(cè)試所得的結(jié)果,。

img1

圖1:純化前、后的病毒收獲液測(cè)試結(jié)果

 

可以從圖上清晰地看出,,純化前的病毒收獲液?jiǎn)畏稚⑿圆?,顆粒粒徑分布較寬,在70-140nm之間均有分布,。而純化后的病毒收獲液具有較好的單分散性,,顆粒粒徑分布較窄,集中在100-110nm之間,。而且純化前后病毒收獲液中含量最高的顆粒粒徑也從70nm轉(zhuǎn)移到了110nm,,表明在純化過程中粒徑較小的顆粒被除去,而粒徑在110nm左右的病毒顆粒被富集,。

接下來讓我們看看存放溫度對(duì)病毒狀態(tài)的影響,,這是使用納米庫爾特粒度儀對(duì)兩個(gè)在不同溫度下存放的病毒樣本進(jìn)行測(cè)試所得的結(jié)果。其中兩個(gè)病毒樣本出自同一批次,,分別在4℃和37℃的條件下各存放12小時(shí)后取出測(cè)試,。

img2 

圖2:在4℃、37℃下各存放12小時(shí)的病毒樣本測(cè)試結(jié)果

測(cè)試結(jié)果顯示,,在37℃下存放的病毒樣本較在4℃下存放的病毒樣本而言,,濃度下降,而且大顆粒增多,,這就表明在前者在存放的過程中發(fā)生了團(tuán)聚,,而這樣的團(tuán)聚對(duì)病毒產(chǎn)品的質(zhì)量會(huì)造成一定影響,。

從上面的實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)中可以看出,納米庫爾特粒度儀在病毒的質(zhì)量控制,,尤其是在對(duì)病毒的粒徑以及濃度的檢測(cè)中能夠發(fā)揮很大的作用,,想必也能為今后病毒研究的發(fā)展助一份力。

 

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