心肌細(xì)胞培養(yǎng)作為一種體外研究模型,,可以更便捷的從細(xì)胞和分子水平對其生長,、發(fā)育、生理,、代謝,、病理等進(jìn)行研究。在許多研究領(lǐng)域原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞作為一種主要的研究模型,,被廣泛應(yīng)用于心血管研究之中,。
原代心肌細(xì)胞培養(yǎng)是體外研究心血管疾病相關(guān)機(jī)制的主要手段和基本技術(shù)?;A(chǔ)實(shí)驗(yàn)中,,與細(xì)胞系相比,原代心肌細(xì)胞的形態(tài)及電生理方面更接近在體細(xì)胞,,因此,,培養(yǎng)原代心肌細(xì)胞的質(zhì)量直接關(guān)系實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程及結(jié)果。
大鼠心肌原代細(xì)胞的處理方法,,給大家分享:
1.大鼠的選擇
新生大鼠鼠齡的選擇新生大鼠心肌細(xì)胞在出生后3 d內(nèi)具有部分的增殖能力,,成年大鼠心肌細(xì)胞則為終末分化細(xì)胞,不再具有分裂增殖能力,。因此,,大鼠出生時(shí)間越短,其心肌細(xì)胞分離后成活率越高,,越容易貼壁生長,。大量觀測表明,選擇1~3 d齡大鼠分離其心肌細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)較為理想.其中尤以半日齡大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)效果較好,。
2.最常見的酶消化法
0.1%的胰蛋白酶重復(fù)消化乳鼠心肌組織多次,,收集的細(xì)胞用含15%胎牛血清的MEM培養(yǎng)基混懸后過濾,純化心肌細(xì)胞后置CO2培養(yǎng)箱孵育。結(jié)果培養(yǎng)的心肌細(xì)胞4~6 h后開始貼壁生長,,12~24 h明顯增殖,,3~4 d后細(xì)胞匯合成片。在倒置顯微鏡下心肌細(xì)胞呈圓形,,梭形,,多角形,伸出偽足,,出現(xiàn)自發(fā)性節(jié)律性搏動(dòng),。結(jié)論應(yīng)用酶消化法可簡便,快速地獲得大量活力高的心肌細(xì)胞,。
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