犬脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)酶聯(lián)免疫試劑盒標本要求
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心,。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心,。
3. 尿液:用無菌管收集,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,,保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實行,。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應再次離心,。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用,。
6. 標本采集后盡早進行提取,,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
犬脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存,。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果,。
2.各步加樣均應使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
3.請每次測定的同時做標準曲線,,做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
5.底物請避光保存,。
6.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
7.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
8.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,,以英文說明書為準,。