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產(chǎn)品簡介
詳細(xì)介紹
三聚氰胺ELISA檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測尿樣,、組織、飼料等樣本中的三聚氰胺,，試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板,、辣根酶標(biāo)記物、抗體,、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成,。檢測時(shí)，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,，樣本中的三聚氰胺和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗三聚氰胺抗體,，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色,，樣本吸光度值與其所含三聚氰胺含量成負(fù)相關(guān),，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中三聚氰胺的殘留量。
二．技術(shù)指標(biāo)
試劑盒靈敏度：1ppb(ng/ml)
反應(yīng)模式：25℃,，30min～15min
檢測下限：
尿液……………………………0.05ppb
組 織（處理法一）……………0.2ppb
組 織（處理法二）……………0.05ppb
飼料……………………………0.5ppb
交叉反應(yīng)率：
克倫特羅………………………100%
馬布特羅………………………<1%
溴布特羅………………………<1%
沙丁胺醇………………………<1%
三聚氰胺……………………<1%
樣本回收率：
尿樣……………………………95%±10%
組織,、飼料……………………85%±15%
三.三聚氰胺ELISA檢測試劑盒試劑盒組成
酶標(biāo)板……………………………96孔
標(biāo)準(zhǔn)液：各1ml
0ppb、0.05ppb,、0.15ppb,、0.45ppb、1.35ppb,、4.05ppb
高標(biāo)準(zhǔn)液（紅蓋）：100ppb………1ml
酶標(biāo)記物（紅蓋）…………………5.5ml
抗體工作液（藍(lán)蓋）………………5.5ml
底物液A（白蓋）……………………6ml
底物液B（黑蓋）……………………6ml
終止液（黃蓋）………………………6ml
20X濃縮洗滌液（白蓋）……………40ml
10X復(fù)溶液(黃蓋)…………………50ml
說明書………………………………1份
四．需要的器材
微量移液器：單道20µl-200µl，100µl-1000µl,、多道300µl
五．樣本處理前須知：
實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭,，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
配液：
配液1：0.1M HCl 溶液
取0.86ml濃HCl加去離子水至100ml,。
配液2：0.1M NaOH 溶液
稱取0.4g NaOH加去離子水至100ml,。
配液3：乙腈-0.1M HCl 溶液
V乙腈:V0.1M HCl =84:16。
配液4：復(fù)溶液
將10×復(fù)溶液用去離子水10倍稀釋，用于樣本的復(fù)溶,，復(fù)溶液在4℃環(huán)境可保存一個(gè)月,。
六．三聚氰胺檢測試劑盒操作流程
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,，每種液體試劑使用前均須搖勻,。取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋,，保存于2-8℃,。
實(shí)驗(yàn)開始前，用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液,。
編 號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置,。
加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,，然后加酶標(biāo)記物50µl/孔，再加入50µl/孔的抗體工作液,，用蓋板膜封板,，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應(yīng)30分鐘,。
洗 滌：小心揭開蓋板膜,，將孔內(nèi)液體甩干，用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,，每次間隔30秒,，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
顯 色：每孔加入底物液A 50µl,，再加底物液B 50µl,，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘,。
終 止：每孔加入終止液50µl,，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng),。
測吸光值：用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）,。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
七． 三聚氰胺ELISA檢測試劑盒結(jié)果分析
百分吸光率的計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)液或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以di一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)液（0ppb）的吸光度值,，再乘以100%,，即
百分吸光度值（%）＝ | A | ×100% |
A0 |
A—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值
標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)液百分吸光率為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)液濃度（ppb）的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo),，繪制標(biāo)準(zhǔn)液的半對(duì)數(shù)曲線圖,。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度，乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中待測物的實(shí)際濃度,。
若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,，更便于大量樣本的準(zhǔn)確,、快速分析,。（歡迎來電索取）
八.注意事項(xiàng)
室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫（25℃）會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低,。
在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象,。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作,。
混合要均勻，洗板要*,，在ELISA分析中的再現(xiàn)性,，很大程度上取決于洗板的一致性。
在所有孵育過程中,，用蓋板膜封住微孔板,，避免光線照射。
不要使用過了有效期的試劑盒,，不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑,。
顯色液若有任何顏色表明變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之,。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個(gè)單位（A450nm< 0.5 ）時(shí),，表示試劑可能變質(zhì)。
反應(yīng)終止液有腐蝕性,，避免接觸皮膚,。
九.貯藏及保存期
儲(chǔ)藏條件：試劑盒于2-8℃保存，避免冷凍,。
保 質(zhì) 期：該產(chǎn)品有效期為1年,，生產(chǎn)日期見包裝盒
十．特別說明
由于不同指標(biāo)檢測的樣本是不同的，處理方式也是不盡相同,，如需了解更多,，更詳細(xì)的技術(shù)參數(shù)可聯(lián)系我司客服專員，歡迎廣大社會(huì)各界朋友前來咨詢和了解,。