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　　大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是在哺乳動物骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞亞群,，具有多種分化潛能，可分化成骨,、軟骨,、脂肪、神經(jīng)和成肌細(xì)胞,。它們不僅機(jī)械地支持骨髓中的造血干細(xì)胞(HSC),，而且還分泌多種生長因子（如IL-6、IL-11,、LIF,、M-CSF和SCF）來支持造血。

　　常用的MSC分離方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法,。全骨髓法是根據(jù)干細(xì)胞在低血清培養(yǎng)基中的優(yōu)勢特性,，定期更換溶液去除非貼壁細(xì)胞，從而達(dá)到純化和擴(kuò)增MSC的目的,。密度梯度離心是根據(jù)骨髓中各細(xì)胞成分的不同比例,，分離出單核細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)，兩者本質(zhì)上沒有太大區(qū)別,。隨著對MSC表面抗原認(rèn)識的深入,，有人采用免疫方法，如流式細(xì)胞儀,、免疫磁珠等,。然而,，流式或磁珠分選細(xì)胞增殖緩慢等問題，加上成本高,、技術(shù)難度大等問題,，在一定程度上限制了這些方法的廣泛應(yīng)用。

 

　　大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)必須保持工作區(qū)域無菌和清潔,。先用紫外線燈和臭氧消毒1h,，然后通風(fēng)30min。操作前需更換細(xì)胞間專用拖鞋,，戴上一次性橡膠手套并用75%乙醇消毒,，戴上實驗服，戴上一次性口罩和帽子,，操作時不要大聲說話,，整個無菌操作應(yīng)在酒精燈周圍進(jìn)行。

　　在大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)過程中,，可在約24小時內(nèi)發(fā)生貼壁生長。細(xì)胞呈圓形,、梭形和三角形,，生長緩慢。液體交換后細(xì)胞增殖明顯,，呈梭形為主,，形態(tài)多樣。70%-80%可在10-14天融合,，達(dá)到通過標(biāo)準(zhǔn),。傳代細(xì)胞形狀單一，有紡錘形或扁平形,，增殖至細(xì)胞融合時呈渦旋狀和放射狀排列,。