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　　各類細(xì)胞產(chǎn)品是我們做實驗研究的基礎(chǔ),，一支小小的細(xì)胞,，關(guān)乎我們各種實驗的成功與否，細(xì)胞的”小事情“,，在實驗中都是”大事情“,，如果你的細(xì)胞出現(xiàn)生長緩慢、不貼壁等情況,，那你可要注意了,，這就是細(xì)胞狀態(tài)不好的信號，要及時“挽救”,，不然很有可能細(xì)胞就瀕臨死亡,。

　　問題一：細(xì)胞生長緩慢

　　細(xì)胞長得慢是細(xì)胞培養(yǎng)過程中比較常見的問題，一般來說,，細(xì)胞活力和濃度一直是細(xì)胞健康的標(biāo)志,，細(xì)胞長得慢的話，活力和濃度可能都會直線下降,。

　　造成細(xì)胞生長緩慢的主要原因及解決方法：

　　1,，新配置的培養(yǎng)基以及換了新的血清，細(xì)胞不適應(yīng);

　　解決方法：最好使用最適宜的培養(yǎng)基,，如果條件不允許,，可以換液時不要全量換液逐漸增加新的培養(yǎng)基比例，1/4,、1/2,、3/4到1，多傳代幾次,，讓細(xì)胞慢慢適應(yīng),。

　　2，細(xì)胞密度不夠

　　有些細(xì)胞是細(xì)胞依賴性細(xì)胞,，密度過低生長緩慢;也可能是細(xì)胞分泌促生長活性物質(zhì)過少,，細(xì)胞連接不好等原因。

　　解決辦法：增加細(xì)胞接種密度;將細(xì)胞從大皿轉(zhuǎn)移至小皿培養(yǎng);適當(dāng)增加培養(yǎng)基血清濃度,。

　　3,，培養(yǎng)環(huán)境改變

　　細(xì)胞培養(yǎng)箱的溫度、CO2,、細(xì)胞的生存環(huán)境要適宜,，一般來說最佳溫度:是37 ℃， CO2:濃度為5% ,， pH:為7.2-7.4,，還有滲透壓等,，大家要注意調(diào)好，不要隨意改變,。

　　4,，污染，如支原體,，細(xì)菌,，真菌等

　　解決辦法：細(xì)胞污染是多方面的原因,，一方面要嚴(yán)格無菌操作技術(shù),、保持清潔的環(huán)境，另一方面,，污染之后要及時鑒別和處理,，并且，建議大家使用品質(zhì)良好的細(xì)胞株和培養(yǎng)基,，這是是減少污染的最好方法,。

　　5，細(xì)胞本身狀態(tài)改變,，如衰老等

　　解決辦法：沒有可逆的辦法,，只能及時更換新的細(xì)胞。

　　當(dāng)然如果培養(yǎng)細(xì)胞是原代的話,，生長速度是比較緩慢的,，如果沒有及時換液，營養(yǎng)成分不夠,，細(xì)胞也會生長緩慢,。用螺旋口瓶培養(yǎng)細(xì)胞時，需將瓶蓋微松,，以保證通氣,，要保持培養(yǎng)箱內(nèi)空氣干凈等。

　　其實只要條件適于細(xì)胞生長,，細(xì)胞在自己的“小房子”里面舒適自由,，那么，它一定會長得很快,，并且,，形態(tài)越來越“漂亮”。

　　問題二：細(xì)胞不貼壁

　　一般來說,，正常情況下,，細(xì)胞培養(yǎng)一段時間后，正常生長的小細(xì)胞們貼在壁上,，優(yōu)哉游哉地享受生活,，而沒能存活的細(xì)胞和其他種類的細(xì)胞則可能懸浮在上,，如果你的細(xì)胞不貼壁，極有可能是沒有存活下來,。

　　細(xì)胞不貼壁可能原因及解決辦法：

　　1,，胰酶消化過度；解決方法：適當(dāng)縮短胰酶消化時間或降低胰酶濃度,。

　　2,，支原體污染；解決方法：分離培養(yǎng)物,，檢測支原體,。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,，丟棄培養(yǎng)物,。

　　3，培養(yǎng)瓶瓶底不干凈,；解決方法：換用新的培養(yǎng)皿或者培養(yǎng)瓶,。

　　4，消化液或培養(yǎng)液配制錯誤,、過期儲存,、儲存不當(dāng)；解決方法：重新配置消化液或培養(yǎng)液

　　5,，細(xì)胞老化,；解決方法：同樣，沒有可逆的辦法,，只能及時更換新的細(xì)胞,。

　　6，接種細(xì)胞起始濃度太低或太高,；解決方法：根據(jù)細(xì)胞特性接種適量的細(xì)胞,。

　　總之，養(yǎng)細(xì)胞需要耐心,，要溫柔,，要不然她真的會給你顏色看哦。上文也提到了,，使用品質(zhì)良好的細(xì)胞株和培養(yǎng)基是減少污染的最好方法,，同時也是保證細(xì)胞生長良好的前提。

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