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浮游菌檢測標準操作規(guī)程
1. 取樣前準備工作
1.1 依據(jù)檢測區(qū)域的取樣點數(shù),，按照《培養(yǎng)基配制,、滅菌標準操作程序》制備適量的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,。
1.2 在超凈工作臺內(nèi),，以無菌操作法將配制好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基以每皿約15mL的裝量分裝,，待培養(yǎng)基凝固后移出潔凈區(qū),。
1.3 將制備的營養(yǎng)瓊脂平皿倒置于隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內(nèi)于30～35℃培養(yǎng)48小時,。取出逐個檢查，確認無菌落數(shù)后即可使用,。
1.4 采樣：將上述制備好的營養(yǎng)瓊脂平皿交與QA人員取樣,。
2. 儀器、設(shè)備和培養(yǎng)基
2.1 所用的儀器,、設(shè)備和培養(yǎng)基
2.1.2 浮游菌采樣器
2.1.3 培養(yǎng)皿（φ90mm×15mm）
2.1.4 培養(yǎng)基（營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基）
2.1.5 恒溫培養(yǎng)箱
2.2 儀器,、設(shè)備、培養(yǎng)基的要求
2.2.1 浮游菌采樣器必須要有流量計和定時器,。
2.2.2 應(yīng)嚴格按儀器說明書的要求進行操作,。
2.2.3 采樣器必須按儀器的檢定周期，定期對儀器作檢定,，以保證測試數(shù)據(jù)的可靠性,，檢驗項目有：定時器,，轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速，流量計,。
2.2.4 每次測試前應(yīng)先接通電源,，啟動真空抽氣泵，然后調(diào)節(jié)流量計和定時器,。
2.2.5 空氣采樣量根據(jù)需要選定,，已知采樣器的流量（L/min）,設(shè)定采樣時間（min）兩者相乘即得采樣量（L）。
2.2.6 采樣口必須用便于消毒及化學性能穩(wěn)定的材料制造,，采樣管嚴禁滲漏,，內(nèi)壁應(yīng)光滑，采樣管的長度應(yīng)根據(jù)測定點的高度定,，盡量減少彎曲,。
3. 測試方法
3.1 測試用儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴格消毒,。
3.1.1 采樣器進入被測房間前先用消毒劑滅菌,。
3.1.2 用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。
3.1.3 采樣前,，先用消毒劑消毒采樣器的頂盤,、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤,。
3.1.4 采樣口及采樣管使用前必須高溫滅菌,，如用消毒劑對采樣管的外壁、內(nèi)壁進行消毒,，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干,。
3.1.5 采樣者應(yīng)穿戴與被測潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前,，雙手用消毒劑消毒,。
3.2 采樣程序
3.2.1 儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開動真空泵抽氣,，使儀器的殘余消毒劑蒸發(fā),，時間不少于5min，并調(diào)好流量,、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速,。
3.2.2 關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿,，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣品縫隙高度,。
3.2.3 置采樣器于采樣點后，開啟采樣器、轉(zhuǎn)動定時器,，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時間,。
4. 測試規(guī)則
4.1 測試狀態(tài)
4.1.1 浮游菌測試前微生物限度檢查室已經(jīng)消毒過。
4.1.2 測試狀態(tài)為靜態(tài)測試,，并在報告中注明測試狀態(tài),。
4.2 測試人員
4.2.1 測試人員必須穿戴符和被測環(huán)境級別的工作服。
4.2.2 靜態(tài)測試時,，室內(nèi)人員不得多于2人,。
4.3 測試時間
4.3.1 對單向流，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于10min后開始,。
4.3.2 對非單向流,，測試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運行不少于30min后開始。
4.4 最少采樣點數(shù)目及其布置,，最小采樣量,，見下表：
4.4.1 工作區(qū)測點位置離地0.8m～1.5m左右，送風口測點位置離開送風面30cm左右,；可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動范圍處增加測點,。4.4.2 每個采樣點一般采樣一次。4.4.3 對于單向流或送風口,，采樣器采樣管口朝向應(yīng)正對氣流方向,；對于非單向流，采樣管口向上,。4.4.4 布置采樣點時,，至少應(yīng)離開塵粒較集中的回風口1m以上。4.4.5 采樣時,，測試人員應(yīng)站在采樣口的下風側(cè)。
5. 培養(yǎng)
取樣結(jié)束后將平皿復(fù)倒置隔水式恒溫水浴培養(yǎng)箱內(nèi)于30～35℃培養(yǎng)48小時,。并以未采樣的營養(yǎng)瓊脂平皿作對照皿,。
6. 菌落計數(shù)
6.1 用肉眼直接計數(shù)，然后用5-10倍放大鏡檢查,，是否遺漏,。
6.2 若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊，可分辨時,，仍以2個或2個以上的菌落計數(shù),。計數(shù)：培養(yǎng)結(jié)束，將上述培養(yǎng)后的平皿取出,，逐個點計菌落數(shù),，必要時用放大鏡檢查，并記錄。
7. 結(jié)果計算
7.1 平均菌落數(shù)的計算見下式：
式中：m 為該房間（或區(qū)域）的平均菌落數(shù),；
m1,、m2‥‥‥mn 為該房間（或區(qū)域）各取樣點的菌落數(shù)；
N 為培養(yǎng)皿總數(shù),。
8. 結(jié)論
8.1 潔凈室（區(qū)）內(nèi)的平均菌落數(shù)必須低于所選定的評定標準,。8.2 若某潔凈室（區(qū)）的平均菌落數(shù)超過評定標準，則必須對此區(qū)域先行消毒,，然后重新測試兩次,，測試結(jié)果必須合格。