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PriCells: 密度梯度分離法分離單個核細胞(MNCs)
PriCells: 密度梯度分離法分離單個核細胞(MNCs)
試劑和材料:
1. 合適的培養(yǎng)基或冷凍液,;
2. PBSA,;
3. Ficoll-Hypague;
4. 巴氏吸管,;
5. 50ml離心管,;
實驗方法:
1. 將臍血樣品用PBSA按1:1比例稀釋;
2. 將15ml Ficoll-Hypague吸入50ml離心管,;
3. 將30mlPBSA稀釋的臍血樣品緩慢地加到Ficoll-Hypague上,;
4. 室溫450g離心20-30min;
5. 離心后,,在Ficoll-Hypague液面上明細可見一層細胞,,是密度低于Ficoll-Hypague液的單個核細胞層;
6. 用巴氏吸管,,將單個核細胞層吸出,,轉(zhuǎn)移到另一離心管中;
7. 用PBSA洗細胞,,室溫200g離心10min,;
8. 倒掉上清,用PBSA重懸細胞,,洗細胞,,重復(fù)上述步驟7;
9. 最后,,用合適的培養(yǎng)基重懸細胞(冰凍液或培養(yǎng)基),;