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PriCells: 蘇木精-伊紅(HE)染色

時間:2021-10-15 閱讀:454
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PriCells: 蘇木精-伊紅(HE)染色
染液制備:
1.      蘇木精染液
(1)    稱取0.5g蘇木精,、5.0g銨礬或鉀礬和0.1g碘酸鈉加溫溶于70ml蒸餾水中;
(2)    加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混勻后過濾即成母液,;
(3)    母液可長期保存,。用蒸餾水以1:20稀釋母液即成工作液。工作液也較長時間儲存,,但每次染色前宜過濾,,去除氧化膜;
2.      伊紅染液
伊紅有醇溶性與水溶性之分,。將0.5g伊紅溶于100ml 70%乙醇或蒸餾水即成工作液,;
染色步驟:
1.      用37℃的溫BSS漂洗3次,每次20s—1min,;
2.      用中性福爾馬林固定30min,;
3.      用蒸餾水漂洗1次,再用蒸餾水稀釋的蘇木jing液(1/20)染10min,;
4.      先用自來水沖洗幾次,,而后置入1% NaHCO3液中漂洗至藍紫色;
5.      在放入伊紅水溶液中染30s—1min,;
6.      用蒸餾水沖洗,,迅速通過丙酮2次,每次3—5min,;
7.      通過2:1丙酮/二甲苯3次,,每次1—2min;
8.      通過1:2丙酮/二甲苯3次,,每次1—2min,;
9.      放入純二甲苯5—10min,用光學樹脂封片后觀察,;
10.    把蓋片置載物玻片上,,令小蓋片細胞面向上,用樹膠封存,再覆以較大蓋片,;
結(jié)果:
原代細胞核染成紅色,,胞質(zhì)染成藍紫色;



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