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PriCells: 原代細胞的脂類染色方法蘇dan紅Ⅲ染色法
PriCells: 原代細胞的脂類染色方法蘇dan紅Ⅲ染色法
原理:
蘇dan紅染料在脂類物質中的溶解度大于其在溶劑中的溶解度,,如果染料與含有脂類的試樣接觸,,便有大量染料進入脂類物質的結構內,,使這些結構呈紅色,。多用蘇dan紅染料,、油紅O、尼羅藍等溶于脂類的染料染色,,使脂質呈色,。也可用四氧hua鋨染色,脂肪酸或膽堿可使四氧hua鋨還原為二氧化鋨而呈黑色,。
配制試劑:
1.蘇dan紅Ⅲ染色液:將1g蘇dan紅Ⅲ溶于加溫的70%乙醇溶液中過濾備用,;
2.甲醛鈣固定液:將10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml;
3.甘油明膠:將12g明膠加入120ml蒸餾水中水浴加熱使其*溶解,,再加入60ml甘油和1g苯酚,,充分混勻后即得。于4℃儲存?zhèn)溆茫?/div>
染色步驟:
1.用Hanks液漂洗蓋玻片3次,;
2.用甲醛鈣固定液固定20min,;
3.用蒸餾水漂洗蓋玻片3次;
4.用70%乙醇將蓋玻片沖洗3次,;
5.用蘇dan紅Ⅲ染色液覆蓋蓋片樣品,,染色10—30min;
6.用70%乙醇漂洗蓋片3次,;
7.用甘油明膠封片后觀察,;
結果:
原代細胞含脂類的區(qū)域呈橘紅色;
PriCells提供:
1.各種原代細胞特制基礎培養(yǎng)基,;
2.各種原代細胞培養(yǎng)特制添加劑,;
3.原代細胞分離試劑盒;
4.原代細胞鑒定試劑盒,;
5.原代細胞總蛋白質抽提物,;
6.原代細胞總RNA;
7.原代細胞總DNA,;
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