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PriCells: 正常晶狀體上皮細胞原代培養(yǎng)
PriCells: 正常晶狀體上皮細胞原代培養(yǎng)
實驗材料：
1. 材料來源：人眼,、兔眼或者豬眼等,；
2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加100IU/ml青霉素,、100μg/ml鏈霉素,，pH7.2；
3. 器械：無齒顯微小鑷子2把,、培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿若干,；
4. 培養(yǎng)液：為含15%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液；
實驗方法：
1. 取材
1）摘取動物或人的供體眼球,，作常規(guī)消毒處理,；
2）用刀片沿角鞏膜緣環(huán)形剪開眼球，除去角膜和虹膜,，并用角膜剪刀剪斷晶狀體懸韌帶,，取出晶狀體,，置于培養(yǎng)皿中；
3）用PBS液洗去黏附在晶狀體表面的虹膜色素及玻璃體,。棄去洗液,；、
4）將晶狀體的凸面向下,，用4號針頭于晶狀體赤道部稍靠后的部位環(huán)刺一圈,，然后用兩把無齒顯微鑷子輕輕分離出晶狀體前囊膜；
2. 原代培養(yǎng),；
1）取下晶狀體前囊膜后,，一般不經(jīng)洗滌。將其剪成余額1.5mm×1.5mm的植塊,；
2）用無齒顯微鑷子挑起植塊,，平貼于培養(yǎng)板中；
3）置于37℃恒溫箱中約5min,，待組織塊稍干后便可加入培養(yǎng)液,；
4）按常規(guī)方法培養(yǎng)。每周換培養(yǎng)液2次,，每次更換2/3的培養(yǎng)液量,；
3. 傳代培養(yǎng)：在培養(yǎng)細胞基本融合形成單層時即需傳代。否則細胞會因生存空間不足或由于細胞密度過大而致營養(yǎng)不足,。按常規(guī)方法進行傳代培養(yǎng),；
PriCells提供：
1. 各種原代細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基；
2. 各種原代細胞培養(yǎng)特制添加劑,；
3. 原代細胞分離試劑盒；
4. 原代細胞鑒定試劑盒,；
5. 原代細胞總蛋白質(zhì)抽提物,；
6. 原代細胞總RNA；
7. 原代細胞總DNA,；