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PriCells: ?；蜇i大血管原代內皮細胞的分離-灌注酶消化法
PriCells: ?；蜇i大血管原代內皮細胞的分離-灌注酶消化法
實驗材料：
1. 牛或豬
2. PBS,，含青霉素100U/ml和鏈霉素100μg/ml
3. 0.1%Ⅰ型膠原酶
4. 眼科剪,，眼科鑷
5. 慕絲線
6. 離心管（15ml,、50ml）
實驗方法：
1. 分離牛或豬的主動脈等大血管,，長15-20cm,，用絲線結扎血管各分支后,，取出主動脈,。放入含青霉素100U/ml和鏈霉素100μg/ml的PBS中,，清洗血管，洗凈血跡,。
2. 用眼科剪和眼科鑷剔除血管外膜的脂肪和結締組織,，用加入抗菌素的PBS沖洗三次。
3. 從血管動脈端注入0.1%Ⅰ型膠原酶溶液,，待血管內殘留的PBS全部流出后,，結扎血管靜脈端，繼續(xù)注入膠原酶溶液,，使血管充盈,。在室溫下消化約30min。
4. 將血管內消化液收集到滅菌的離心管內,，1000r/min,，離心10min,。吸去上清,，加入培養(yǎng)液制成細胞懸液。調整細胞密度至1.5×105個/ml,。
5. PriCells-原代內皮細胞特制基礎培養(yǎng)基
6. PriCells-原代內皮細胞培養(yǎng)特制添加劑
7. PriCells-原代細胞分離試劑盒