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原代肺泡上皮細胞的體外分離培養(yǎng)
PriCells：
原代肺泡上皮細胞（Primary Alveolar Epithelial Cells）的體外分離培養(yǎng)
1、*無血液殘留肺臟組織：
2,、消化肺組織：
常用細胞消化酶：胰蛋白酶、彈性蛋白酶,、膠原酶,。
經(jīng)支氣管將酶灌注到完整的肺中消化，或把肺組織剪碎放入消化液中消化,。前者比后者更有效。
3,、分離純化細胞：
原代肺泡上皮細胞的分離純化主要方法：
（1）密度梯度離心法：
密度梯度離心分離細胞的原理是不同細胞的沉降系數(shù)不同,，在密度梯度離心中細胞所處的位置也相應不同。 用ficoll或percoll不連續(xù)梯度離心法分離肺泡Ⅱ型上皮細胞,。
（2）濾膜分離法：
肺泡Ⅱ型上皮細胞約10mm,，比巨噬細胞(約25mm)和Ⅰ型細胞 (50mm-100mm)小，用150mm孔徑的濾膜初濾除去大的組織碎片,，30mm-40mm孔徑的濾膜除去全部Ⅱ型細胞和部分巨噬細胞,，采用 15mm的濾膜精濾。用濾膜分離操作簡單,，它和其他分離方法聯(lián)合使用可以提高純度,。
（3）流式細胞技術(shù)法：
根據(jù)不同細胞之間的熒光差異，用熒光物質(zhì)標記篩選,。肺泡上皮細胞內(nèi)含有豐富的脂類物質(zhì),，用親脂性熒光素標記，可以得到純度很高的細胞,。流式技術(shù)分離細胞的產(chǎn)量很低,，但純度*。這種技術(shù)經(jīng)過完善在將來會更有吸引力。
（4）免疫黏附法：
用IgG包被培養(yǎng)板,，把肺泡上皮細胞懸液置于板上,，巨噬細胞和其他大多數(shù)非肺泡上皮細胞因為含有Fc片段的受體而與IgG結(jié)合，吸附到板上,，不黏附的肺泡上皮細胞被沖洗下來,，簡便易行，可除去絕大多數(shù)的巨噬細胞,，有效的提高肺泡上皮細胞純度,。
（5）貼壁選擇法：
貼壁選擇原理：肺泡上皮細胞完成貼壁的時間不同，這種特性用肺泡上皮細胞培養(yǎng)時做篩選,。
總之,，根據(jù)肺泡上皮細胞培養(yǎng)最終目的，綜合幾種方法能達到預期效果,。
例如：（1）先用濾膜過濾,；（2）再用IgG包被法。
4,、PriCells的產(chǎn)品
（1） 原代肺泡上皮細胞,， 5×105 細胞數(shù)/1ml
（2） 原代細胞分離試劑盒
（3） 原代細胞分離鑒定盒
（4） 原代上皮細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基
（5） 原代上皮細胞培養(yǎng)特制添加劑