（4）鑭系：鑭系螯合物某些3價稀土鑭系元素如銪（Eu3）,、鋱（Tb3）、鈰（Ce3）等的螯合物經(jīng)激發(fā)后也可發(fā)射特征性的熒光,，其中以Eu3 應用*,。Eu3螯合物的激發(fā)光波長范圍寬，發(fā)射光波長范圍窄,，熒光衰變時間長,，最shi合用于分辨熒光免疫測定。

（5）藻紅蛋白（P-phycoerythrin,，PE）：PE是在紅藻中所發(fā)現(xiàn)的一種可進行光合作用的自然熒光色素,，分子量為240kD的蛋白，最大吸收峰為564 nm,，當使用488 nm激光激發(fā)時其發(fā)射熒光峰值約為576 nm,，對于單激光器的流式細胞儀來說，推薦使用585±21nm的帶通濾光片,，雙激光器的流式細胞儀推薦使用575±13nm的帶通濾光片,。FL2探測器檢測PE。

（6）多甲藻葉綠素蛋白 （peridinin chlorophyll protein,，PerCP）：PerCP是在甲藻和薄甲藻的光學合成器中發(fā)現(xiàn)的,，是一種蛋白復合物，分子量約為35kD,，最大激發(fā)波長的峰值在490nm附近,，當被488nm氬離子激光激發(fā)后，發(fā)射光的峰值約為677nm,。FL3探測器檢測PerCP。

（7）碘化丙啶（ propidium iodide,，PI）：可選擇性地嵌入核酸（DNA,、RNA）的雙螺旋堿基對中。在對DNA染色時,，需用RNase對細胞進行處理,，以排除RNA對DNA熒光定量精度的影響。在488nm波長激發(fā)下,，PI的發(fā)射光譜為610-620nm,。 FL2探測器檢測PI,。

 

常見熒光素的特性：

（1）FITC：黃色結(jié)晶粉末，吸收光：490~495nm,，發(fā)射光：520~530nm,，明亮的黃綠色熒光。

（2）RB200：橘紅色粉末, 吸收光570nm,，發(fā)射光595~600nm,，橘紅色熒光。

（3）TRITC：紫紅色粉末,，吸收550nm,，發(fā)射光620nm，橙紅色熒光,。

（4）鑭系：Eu,、Tb

（5）PE：吸收光490～560nm，發(fā)射光595nm,，紅色熒光,。

（6）其它：酶作用后產(chǎn)生熒光物質(zhì)。

酶作用后產(chǎn)生熒光物質(zhì)：

酶作用后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)某些化合物本身無熒光效應,，一旦經(jīng)酶作用便形成具有強熒光的物質(zhì),。例如，4-甲基傘酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基傘酮,，后者可發(fā)出熒光,，激發(fā)光波長為360nm，發(fā)射光波長為450nm,。其他如堿性磷酸酶的底物4-甲基傘酮磷酸鹽和辣根過氧化物酶的底物對羥基苯乙suan等。鑭系螯合物 某些3價稀土鑭系元素如銪 (Eu3+),、鋱 (Tb3+) 等的螯合物可發(fā)射特征性的熒光,，而且激發(fā)光波長范圍寬、發(fā)射光波長范圍窄,、熒光衰變時間長,，最shi合于時間分辨熒光免疫測定,。

 

（1）具有與蛋白質(zhì)形成共價鍵的化學基團。

（2）熒光效率高,，標記后下降不明顯,。

（3）熒光色澤與背景色澤對比鮮明。

（4）標記后能保持生物學活性和免疫活性

（5）標記方法簡單,、快速。

（6）安全無毒