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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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| 一、細胞基本屬性 | |
| 細胞名稱 | 豬睪丸細胞 |
| 細胞別稱 | ST; Swine Testis; STOMA24; Stoma 24; ST-IOWA; ATCC-ST |
| 細胞貨號 | SNL-136 |
| 細胞種屬 | 豬 |
| 生長情況 | 貼壁 |
| 培養(yǎng)條件 | H-DMEM+10%FBS+1%雙抗 |
| 培養(yǎng)環(huán)境 | air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5% |
| 二,、細胞培養(yǎng)操作 | |
| 換液周期 | 2-3天 |
| 培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml,；10cm皿12-15ml |
| 傳代比例 | 1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定） |
| 傳代方法 | 1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基； 2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,，吸走潤洗的PBS,； 3.T25瓶加1ml左右胰M，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰M鋪勻瓶底細胞層,； 4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化,； 5.消化到細胞間隙變大，但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰M消化,； 6.混勻細胞,，900rpm離心3-5min,，棄上清； 7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,； 8.補足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),； |
| 注意事項 | 不同品牌胰M消化時間差別較大,，注意嚴格控制消化時間 消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài),。 |
| 三,、細胞凍存操作 | |
| 凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦); |
| 凍存規(guī)格 | 200-300萬/ml，1ml每管 |
| 凍存方法 | 1. 離心獲得細胞沉淀后,，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞,； 2. 將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管； 3. 將凍存管轉入程序凍存盒,，放入-80度冰箱過夜,，第二天轉入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室,，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,，再-20度靜置2h后轉入-80度過夜，第二天轉入液氮保存 |
| 注意事項 | 凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,，若有異常,，及時調(diào)整實驗方案 |
Tips：
1.細胞貼壁偏緊，消化時間偏長,，注意控制消化時間,；
2.細胞培養(yǎng)時黑點可能會比較多，具體原因參見培養(yǎng)操作說明2,、3條,；
3.細胞內(nèi)有部分空泡存在，是細胞正常特性,，無須擔心,；
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