關(guān)于是否應(yīng)對胎牛血清進(jìn)行熱滅活處理一直存在爭議。血清滅活起源于20世紀(jì)70年代之前,，在過去并未有人質(zhì)疑滅活的必要性,，滅活一直是默認(rèn)的常規(guī)操作。然而越來越多的證據(jù)表明,，血清熱滅活對細(xì)胞并沒有顯著的正面作用,。隨著研究者們對血清的理解加深以及胎牛血清生產(chǎn)工藝的不斷進(jìn)步,，如今熱滅活不再是必選項(xiàng)。
什么是滅活
血清熱滅活是指將溶解狀態(tài)的血清置于56℃水浴加熱30min,。滅活的主要目的是為了去除血清中的補(bǔ)體成分或者支原體等病原體,。
什么是補(bǔ)體
補(bǔ)體是存在于動物血液與組織液中的一組經(jīng)活化后具有酶活性的蛋白質(zhì)，它們可輔助特異性抗體完成免疫溶菌和溶血作用,，故稱為補(bǔ)體,。激活的補(bǔ)體可介導(dǎo)細(xì)胞毒性作用，刺激平滑肌細(xì)胞收縮,，刺激血小板釋放組胺,，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等。
血清中的補(bǔ)體
胎牛的補(bǔ)體系統(tǒng)的發(fā)育不完整,，因此胎牛血清中的補(bǔ)體含量非常低,。Triglia和Linscott測定了牛血清中9種補(bǔ)體成分：胎牛血清中凝集素、C1和C6的含量約為成年牛的1-3%,，除C3外其余成分的含量約為成年牛的5-50%,，C3活性幾乎檢測不到。在補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)中,，在未稀釋的血清中并未出現(xiàn)溶血現(xiàn)象,。
熱滅活對細(xì)胞的影響
熱滅活并不會改善細(xì)胞的狀態(tài)。加熱血清會導(dǎo)致生長因子,、維生素,、氨基酸等多種營養(yǎng)物質(zhì)被破壞，反而影響細(xì)胞的增殖速度和貼壁能力,。有研究表明,，熱滅活會損害血清中一些促進(jìn)細(xì)胞附著的成分。除此之外,，熱滅活過程中還會產(chǎn)生大量的沉淀,，這些沉淀物可能被誤認(rèn)為是微生物污染，從而給實(shí)驗(yàn)帶來不必要的困擾,。
支原體問題
尚恩生物血清產(chǎn)品經(jīng)過萬級GMP標(biāo)準(zhǔn)過濾灌裝線,連續(xù)3道0.1um濾膜過濾,。通過細(xì)菌、真菌,、支原體,、噬菌體、病毒等多種病原體檢測,，完quan不用擔(dān)心污染問題,，也不需要用熱滅活的方式進(jìn)行滅菌。
綜上，對于細(xì)胞培養(yǎng)效果而言,，血清滅活可能弊大于利,。因此大部分細(xì)胞培養(yǎng)沒有必要進(jìn)行血清滅活去除補(bǔ)體。不過在某些特殊情況下,，如某些免疫學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)或平滑肌細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn),，可能需要對血清進(jìn)行滅活處理。在實(shí)際應(yīng)用中,，同學(xué)們還是要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求來決定是否滅活血清哦~
參考文獻(xiàn)
1. Triglia, R.P., Linscott,W.D. Titers of nine complement components, conglutinin and C3b-inactivator in adult and fetal bovine sera. Mol Immunol 17, 741-748 (1980).
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