細胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為當今生命科學各領(lǐng)域的基礎(chǔ)技術(shù)和基本技能,，它也是細胞工程,、基因工程和生物醫(yī)學工程的重要研究手段。那我們在實際的動物細胞培養(yǎng)實驗中需要注意哪些基本要求呢,？
①手指不能觸及器材使用端,。如觸及,，器材需更換或燒灼后再使用（如瓶口）。
②減少手與器材的接觸面,，學會手指操作,。
③一切操作，如打開或封閉瓶口,，安裝吸管,、注射器等，都要在火焰前方進行,。瓶口,、吸管、注射器使用前要經(jīng)過火焰消毒后使用,。
④瓶口順風斜放在支架上。試劑用后立即封閉瓶口,。瓶口長時間敞開會增加落菌的機會,。
⑤不同的細胞同時操作時，要專管專用，并要勤換吸管,，防止擴大污染和交叉污染,。
⑥瓶口液滴不能倒回瓶內(nèi)。液滴用干酒精棉球擦拭,，瓶口再經(jīng)火焰消毒,。
⑦操作者動作要準確敏捷，盡量避免空氣流動,。
洗手,、著裝與外科臨床要求相同。雙手用肥皂洗凈后浸泡于消毒液中,，并用75%的酒精擦拭,。細胞培養(yǎng)用液從冰箱取出，試劑瓶口和外壁經(jīng)灑精外布擦洗后人超凈臺,，超凈臺面要用酒精紗布擦拭,。超凈臺上的物品面布局合理，污染廢液缸,、酒精棉球缸在右側(cè)位,，酒精燈在中央位，試劑瓶在左側(cè)位,。拆除大包裝,，點燃灑精燈（95%灑精）、火焰無色或微黃色表示酒精雜質(zhì)少,，酒精燃燒*（不能使用廢酒精或工業(yè)酒精,，這類酒精燃燒時產(chǎn)生的化學物質(zhì)易附著到吸管或其他瓶、皿上,，帶入培養(yǎng)液中會傷害細胞）,。
浸泡75%酒精中的金屬器械用臺面消毒鑷子取出，經(jīng)無菌干紗布擦拭后,，迅速通過火焰（器械不能在火焰中灼燒過長時間）,，冷卻后使用，避免燙傷細胞,。細胞培養(yǎng)液,、牛血清、酶液的吸管,，使用后不能再用火焰消毒,，因為吸管中殘留的培養(yǎng)液被燒焦碳化，再使用時,，會把有害碳化物帶入培養(yǎng)液中毒害細胞,。操作中手指被污染時,，可用酒精紗布或棉球擦拭。在實驗過程中,，不要面向操作臺講話或咳嗽,，避免將唾沫中微生物帶入超凈臺內(nèi)，污染空氣,。實驗者離開超凈臺時,，立即用肘關(guān)節(jié)關(guān)閉側(cè)窗口，避免無菌室內(nèi)細菌隨空氣流入凈化操作區(qū),。
無菌操作離不開火和酒精,，操作中避免事故發(fā)生。要用打火機點火,?；鸩顸c火時，火星熄滅后投入廢缸內(nèi)（缸內(nèi)有廢酒精棉球）,。酒精濺出臺面或瓶外壁時,，立即擦干；一旦發(fā)生著火事故,，立即關(guān)閉超凈臺風機,，用飯盒、濕布撲滅火焰,。
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