胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛,。顯然,,胎牛血清是品質(zhì)*高的,因為胎牛還未接觸外界,,血清中所含的抗體,、補體等對細胞有害的成分*少。
1,、性狀,、外觀 淺黃色澄清、無溶血,、無異物稍粘稠液體,。
2、蛋白質(zhì)含量 3.5%~5.0%( w/v)
3,、血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)
4,、無菌檢驗 陰性
5、支原體檢驗 陰性
6,、細菌內(nèi)毒素 ≤5(EU/ml)
7,、牛腹瀉病毒 陰性
8、大腸桿菌噬菌體 陰性
9,、支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長曲線(接種濃度)*大增殖濃度≥2.5×106 個/ml細胞倍增時間 ≤15h克隆率 ≥85%,。
胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛,。
其次,,組份與比例不同:兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子,、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,,用途與用法不同:某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可,,使用濃度不同,,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%,。
血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ,,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,,并經(jīng)常搖勻使之溶解,,然后至室溫放置使之升溫,不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,,如放在37℃解凍,,顏色加深,粘稠度也會增加,,血清在解凍和熱滅活后,,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融,。
胎牛血清,,小牛血清和新生牛血清三種之間的區(qū)別:這三種血清的成份,總體沒有什么明顯差別,,只是有一些成分與其生存環(huán)境有關(guān),,如上述有人說的抗體很等少。此外,,因生長發(fā)育的需要,,有些成分在小牛出生后會發(fā)生一些變化。不過還沒有搞清楚它與其它的血清之間的差別,。有一點可以肯定,,胎牛血清中的部分功能蛋白與小牛血清中的含量有差別。
重要的一點是,,胎牛本身生活在一個潔凈環(huán)境當(dāng)中,,其血清與外界隔絕,只要生產(chǎn)工藝科學(xué)規(guī)范,,其質(zhì)量肯定要比后兩者好,。
根據(jù)牛出生時間和血清采制分離方法分為:
1、胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血;
2,、新生牛血清:出生12-24小時新生牛靜脈采血;又可細分為:a.**新生牛血清:采血后靜置自然析出的血清;b.標(biāo)準新生牛血清:c.經(jīng)離心分離的血清;d.普通新生牛血清:融血或微融血的血清;
3.小牛血清:出生三月齡小牛動脈采血分離血清;
血清是血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,,且血清組成及含量常隨供血動物的性別,、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異,。血清中含有各種血漿蛋白,、多肽、脂肪,、碳水化合物,、生長因子、激素,、無機物等,,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的,。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展,但仍存在一些問題,。
胎牛血清是品質(zhì)*高的,,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體,、補體等對細胞有害的成分少。
一般選用血清種類可以根據(jù)ATCC及實驗需要來選擇,。其實,,除了一些比較嬌貴的細胞,如干細胞之類的,,其余的大部分細胞培養(yǎng),,用國產(chǎn)的足以!而且MRC品牌血清之類的口碑也頗好,性能也比較穩(wěn)定,,所以很多實驗室都在用,。
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