原代細胞復蘇的操作步驟:
(1)從液氮容器中取出凍存管,,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化,。
(2)從37℃水浴中取出凍存管,,75%酒精消毒后,打開蓋子,,用吸管吸出細胞懸液,,加到離心管中。PriCells推薦接種培養(yǎng)瓶,,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),。
(3)離心,1000rpm,,5min,。PriCells推薦不離心。
(4)棄去上清液,,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,,計數(shù),調(diào)整細胞密度,,接種培養(yǎng)瓶,,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。PriCells推薦小牛血清濃度依據(jù)原代細胞種類,。
(5)次日更換一次1/2培養(yǎng)液,,繼續(xù)培養(yǎng)。
原代細胞復蘇操作注意事項:
(1)將凍存管從液氮容器中取出時,,要做好防護工作,,以免凍傷,。
(2)取出凍存管后立即放入水浴中,使其盡快融化(在1-2分鐘內(nèi)),。
(3)復蘇*好用新配制的培養(yǎng)液,。
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