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毛細(xì)管電泳儀運(yùn)行期間的清潔處理方法

閱讀:2095      發(fā)布時(shí)間:2021-5-19
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   毛細(xì)管電泳儀(以下簡稱儀器)是根據(jù)在電解質(zhì)溶液中,,帶電粒子在高壓電場作用下,以不同的速度定向遷移的現(xiàn)象來達(dá)到組分分離的目的,。各組分分離后通過檢測器進(jìn)行檢測,,并根據(jù)各組分的遷移時(shí)間和響應(yīng)值進(jìn)行定性、定量分析,。電泳的支持物是彈性石英毛細(xì)管,。
  毛細(xì)管電泳儀每次運(yùn)行間毛細(xì)管的清潔處理:
  ·在相同實(shí)驗(yàn)條件下每個(gè)樣品之間的沖洗步驟應(yīng)只以運(yùn)行緩沖液沖洗為佳,避免NaOH,、水等物質(zhì)的沖洗,。
  ·緩沖液沖洗的時(shí)間一般為2-5min,如果重復(fù)性不佳,,可提高沖洗壓力或延長時(shí)間來嘗試提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性,。
  ·若以上步驟還是難以達(dá)到理想的實(shí)驗(yàn)重復(fù)性且出現(xiàn)每次出峰時(shí)間的后移情況,則是因?yàn)闃悠分形镔|(zhì)在毛細(xì)管內(nèi)壁的吸附所引起,,此時(shí)則需要使用0.1M NaOH的沖洗,,沖洗時(shí)間為2min左右,以去除毛細(xì)管內(nèi)壁上的吸附物,,此后再用水和運(yùn)行緩沖液較長時(shí)間沖洗,,以確保緩沖液與毛細(xì)管內(nèi)壁之間的平衡穩(wěn)定形成,。
  ·對(duì)于使用SDS或CTAB等表面活性劑的實(shí)驗(yàn),需要注意這些表面活性劑與毛細(xì)管表面之間的平衡對(duì)實(shí)驗(yàn)重復(fù)性是至關(guān)重要的,。所以此類實(shí)驗(yàn)一般不采用NaOH洗毛細(xì)管,,而是采用緩沖液的長時(shí)間沖洗和預(yù)電泳來提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。當(dāng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到一定次數(shù)以后再用NaOH米清潔毛細(xì)管,,并用運(yùn)行緩沖液長時(shí)間沖洗獲得平衡,。
  毛細(xì)管插入樣品溶液后,應(yīng)立即開始進(jìn)樣操作,,完成后迅速移至緩沖液中開始電泳,。否則會(huì)產(chǎn)生毛細(xì)作用和虹吸現(xiàn)象,引起誤差并使譜帶展寬,。
  毛細(xì)管電泳儀使用操作:
  1.電極不要和毛細(xì)管接觸,,樣品貯器和緩沖液貯器液面的高度應(yīng)保持平衡。
  2.使系統(tǒng)盡可能保持恒溫,。因溫度直接影響粘度,,而影響進(jìn)樣量的恒定。
  3.樣品溶液中的溶劑需要與緩沖液互溶,,前者的離子強(qiáng)度應(yīng)低于后者,。
  4.防止樣品溶液和緩沖液蒸發(fā)、損耗,。

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