酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被大鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)抗體的包被微孔中,，依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的大鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，計算樣品濃度,。

　　【標(biāo)本收集注意事項】

　　收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管,。

　　血清和血漿避免使用溶血,，高血脂標(biāo)本。

　　標(biāo)本應(yīng)清澈透明,，懸浮物應(yīng)離心去除,。

　　標(biāo)本收集后若不及時檢測，需按一次使用量分裝,，凍存于-20℃,，-80℃電冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融,。

　　可根據(jù)標(biāo)本的實際情況,，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議做預(yù)實驗，以確定稀釋倍數(shù)),。

　　收集標(biāo)本,，盡量做到雙份的用量，避免一次實驗失敗,，重復(fù)實驗時標(biāo)本缺失，從而耽誤實驗進(jìn)程,。

　　收集標(biāo)本時,，應(yīng)該做好防護(hù)措施（比如戴手套，口罩,，護(hù)目鏡等）,，認(rèn)為所有標(biāo)本都具有一定的潛在危險性。

　　樣本處理應(yīng)該在生物安全柜里面,，并且正確使用生物安全柜,。

　　【注意事項】

　　酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒使用前請保存在2-8℃,。除復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品，其他成分不可凍結(jié),。

　　濃縮酶結(jié)合物體積小,，運輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋,。因此使用前請用手甩幾下或1000rpm離心1分鐘,，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。

　　濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。