一、   酶聯(lián)免疫吸附實驗液體樣本：

1.    血清：PP管（不含熱原和內(nèi)毒素）收集全血,，室溫自然凝固20-30分鐘,，或4℃過夜，分離出血清,，（適當傾斜離心管以擴大液面的橫截面,，使血清能更大程度分離出來）。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分離心20-30分鐘,，將血清和紅細胞迅速小心地分離,，收集上清，立即進行測定,。如暫不檢測可將收集的血清分裝保存于-20℃或-80℃,，避免反復凍融，保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應再次離心,。血清樣本應注意避免溶血和細菌污染。

2.    血漿：使用抗凝管或加入抗凝劑（EDTA,、檸檬酸鈉或肝素）的PP管收集全血,，混合10-20分鐘，4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,，離心20-30分鐘,，收集上清，立即進行測定,，如暫不檢測可將收集的血清分裝保存于-20℃或-80℃,，避免反復凍融。樣本應避免溶血或高血脂,。保存過程中如有沉淀形成,，應該再次離心。

3.    尿液,、胸腹水,、腦脊液,、母乳、唾液：用無菌管收集樣本,，4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,，離心20-30分鐘。仔細收集上清,，保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。

4.    細胞培養(yǎng)上清：

1)        胞外：無菌管收集,，4℃ 2000轉(zhuǎn)/分,，離心20-30分鐘，除去細胞碎片和雜質(zhì),，收集上清液備用,，樣本保存在-20℃或-80℃，避免反復凍融,，保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。

2)        胞內(nèi)：加入裂解液,，或用pH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,，使細胞濃度達到100萬/ml左右，通過反復凍融（如果反復凍融,，破碎效果不好,，可采用超聲波破碎），使細胞膜破壞并釋放出細胞內(nèi)成分,，2000轉(zhuǎn)/分,，離心20-30分鐘，收集上清,。

二,、酶聯(lián)免疫吸附實驗固體樣本：

1.    組織標本：標本采集后用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩Ｊ褂脮r切割標本,，稱取1g左右組織，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,，用手工或勻漿器將標本勻漿充分,。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分，離心20分鐘,，仔細收集上清,。分裝一份待檢測，其余冷凍備用,，保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心,。

2.    植物標本：取0.1g新鮮植物組織樣本，液氮中充分研磨,；加入樣品體積9倍的提取液（pH7.2-7.4左右的PBS）,，4℃ 8000轉(zhuǎn)/分離心30分鐘，取上清并暫時保存于4℃待用,。如需精確提取,，可在液氮研磨后加入1ml的提取液（80%甲醇）, -20℃過夜后再4℃ 8000轉(zhuǎn)/分，離心1小時,，取上清,；上清液過C-18固相萃取柱，過柱后的樣本真空干燥或氮氣吹干,，保存?zhèn)溆?；上樣前加入pH7.2-7.4左右的PBS緩沖液（1ml定容）?；靹蚝笫覝胤胖?0分鐘,，4℃8000轉(zhuǎn)/分，離心15分鐘,，取上清并暫時保存于4℃待用,。

3.    土壤：稱取1g土壤，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,，充分混勻,。4℃ 2000轉(zhuǎn)/分，離心20分鐘,，仔細收集上清,。分裝一份待檢測，其余冷凍備用,，保存過程中如有沉淀形成,，應再次離心。