Carrier DNA

● 產品規(guī)格

● 產品說明

Carrier DNA (鮭魚精DNA) 為短的線形單鏈DNA,，可包裹質粒DNA，在酵母細胞攝取外源質粒DNA過程中發(fā)揮作用,，促進質粒進入酵母細胞,，另外還可保護質粒免于被DNA酶降解。在每次使用前務必進行兩次熱變性,，保證Carrier DNA在轉化實驗體系中以單鏈形式存在,。

Carrier DNA是青旗生物生產的酵母感受態(tài)細胞轉化所必需的配套試劑，每個轉化反應需要10µl Carrier DNA,。

● 操作方法

1. Carrier DNA 在每次使用前要通過加熱處理使其變性為單鏈狀態(tài)，步驟如下：Carrier DNA 放95℃水浴或金屬浴3 min,，快速插入冰中,，靜置3 min，再次放95℃水浴或金屬浴3 min,，快速插入冰中,，靜置3 min以上。

2. 取100 µl冰上融化的酵母感受態(tài)細胞,，依次加入預冷的目的質粒2-5 µg,，Carrier DNA 10 µl，PEG/LiAc 500 µl并吸打幾次混勻,，30℃水浴30 min (15 min時翻轉6-8次混勻),。

3. 將管放42℃水浴15 min (7.5 min時翻轉6-8次混勻)。

4. 5000 rpm離心 40 s棄上清,，ddH₂O 400 µl 重懸,，離心 30s棄上清。

5. ddH₂O 50 µl重懸，涂板,，29℃培養(yǎng)48-96 h,。

● 注意事項

1. 在每次使用前務必進行兩次熱變性，保證Carrier DNA在轉化實驗體系中以單鏈形式存在,。

2. Carrier DNA 可在4℃短時間保存,，如需長時間保存請放-20℃。